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Anticorpi contro il DNA a doppio filamento - autoanticorpi diretti contro il proprio DNA a doppio filamento, osservati con lupus eritematoso sistemico. Ricercato per diagnosticare, valutare l'attività e controllare il trattamento di questa malattia.

Sinonimi russi

Anticorpi al DNA a doppia elica, anticorpi al DNA nativo, anti-DNA.

Sinonimi inglesi

Anticorpo a ds-DNA, anticorpo nativo a DNA a doppio filamento, anti-DNA, anticorpo a doppio filamento di DNA.

Metodo di ricerca

Saggio immunoassorbente legato all'enzima (ELISA).

Unità di misura

IU / ml (unità internazionale per millilitro).

Quale biomateriale può essere utilizzato per la ricerca?

Come prepararsi per lo studio?

Non fumare per 30 minuti prima di donare il sangue.

Informazioni generali sullo studio

Gli anticorpi anti-DNA a doppio filamento (anti-dsDNA) appartengono al gruppo degli anticorpi antinucleari, cioè agli autoanticorpi diretti dal corpo contro i componenti dei propri nuclei. Mentre gli anticorpi antinucleo sono caratteristici di molte malattie del gruppo di malattie del tessuto connettivo diffuse, l'anti-dsDNA è considerato specifico per il lupus eritematoso sistemico (SLE). Rilevazione di anti-dsDNA è uno dei criteri per fare una diagnosi di "SLE".

L'anti-dsDNA può essere rilevato mediante saggio immunoenzimatico. L'alta sensibilità (circa il 100%) di questo test è necessaria quando si esaminano campioni con una bassa quantità di anticorpi. Considerando che diversi tipi di autoanticorpi possono essere presenti contemporaneamente nel siero di pazienti con malattie sistemiche del tessuto connettivo, e anche il fatto che spesso la diagnosi differenziale di queste malattie si basa sull'identificazione di un particolare tipo di anticorpo, è estremamente importante tener conto dell'elevata specificità nella scelta di un test di laboratorio. La specificità del dosaggio anti-dsDNA è del 99,2%, il che rende questo studio indispensabile nella diagnosi differenziale di SLE.

L'anti-dsDNA è rilevato nel 50-70% dei pazienti al momento della diagnosi "SLE". Si ritiene che i complessi immuni costituiti da DNA a doppio filamento e anticorpi specifici (immunoglobuline IgG e IgM) siano coinvolti nello sviluppo delle microvascoliti e causino la sintomatologia caratteristica del LES sotto forma di danni alla pelle, ai reni, alle articolazioni e a molti altri organi. L'anti-dsDNA è così tipico di SLE che consente di diagnosticare questa malattia anche con un test di screening negativo per gli anticorpi antinucleari. Tuttavia, va notato che l'assenza di anti-dsDNA non esclude la presenza di SLE.

Il rilevamento di anti-dsDNA in un paziente senza segni clinici e altri criteri di questa malattia non è interpretato a favore della diagnosi di "SLE", ma tali pazienti sono a rischio di sviluppare SLE in futuro e devono essere monitorati da un reumatologo, poiché la comparsa di anti-dsDNA può precedere l'insorgenza malattie per diversi anni.

La concentrazione di anti-dsDNA varia a seconda delle caratteristiche del decorso della malattia. Di norma, un indice alto indica un'attività elevata di SLE, mentre uno basso indica una remissione della malattia. Pertanto, la misurazione della concentrazione di anti-dsDNA viene utilizzata per monitorare il trattamento e la prognosi della malattia. L'aumento della concentrazione indica un controllo insufficiente della malattia, la sua progressione, così come la possibilità di lupus nefrite. Al contrario, una concentrazione costantemente bassa di anticorpi è un buon segno prognostico. Va notato che questa dipendenza non è osservata in tutti i casi. Il livello di anti-dsDNA viene misurato regolarmente, ogni 3-6 mesi, in caso di lieve gravità di SLE ea intervalli più brevi quando non vi è alcun controllo sulla malattia, con la scelta della terapia, durante la gravidanza o il periodo postparto.

La sindrome clinica speciale è il lupus della droga. Nonostante la significativa somiglianza del quadro clinico di questa condizione con LES, il lupus della droga presenta una serie di differenze: innescato dall'assunzione di farmaci (procainamide, idralazina, propiltiouracile, clorpromazina, litio, ecc.) E scompare completamente dopo la loro cancellazione, raramente coinvolge gli organi interni e quindi ha più prognosi favorevole, e meno spesso combinata con la presenza di anti-dsDNA. Pertanto, quando un risultato negativo dell'analisi anti-dsDNA in un paziente con segni clinici di lupus autoimmune e la presenza di un fattore antinucleare, il lupus deve essere escluso.

Nonostante il fatto che un alto anti-dsDNA sia caratteristico del SLE, la loro bassa concentrazione si riscontra anche nel sangue dei pazienti e con alcune altre malattie del tessuto connettivo diffuse (sindrome di Sjogren, una malattia mista del tessuto connettivo). Inoltre, il test può essere positivo nei pazienti con epatite B e C cronica, cirrosi biliare primitiva e mononucleosi infettiva.

Lo spettro degli autoanticorpi in SLE include anche altri anticorpi antinucleari (anti-Sm, RNP, SS-A, SS-B), anti-plasma e anti-fosfolipidi. Trovarli nel siero di un paziente con segni clinici di SLE insieme a anti-dsDNA aiuta anche a fare una diagnosi. Inoltre, la determinazione della concentrazione di anti-dsDNA deve essere integrata con alcune analisi cliniche generali.

A cosa serve la ricerca?

  • Per la diagnosi, la valutazione dell'attività e il monitoraggio del trattamento del lupus eritematoso sistemico;
  • per diagnosi differenziale di malattie diffuse del tessuto connettivo.

Quando è programmato uno studio?

  • Con sintomi di lupus eritematoso sistemico: febbre, lesioni cutanee (eritema farfalla o eruzioni cutanee rosse sul viso, avambracci, torace), artralgia / artrite, polmonite, pericardite, epilessia, danno renale;
  • quando rileva anticorpi antinucleari nel siero, specialmente se si ottiene un tipo di nucleo immunofluorescente omogeneo o granulare (maculato);
  • regolarmente, ogni 3-6 mesi, con una lieve gravità di SLE o più spesso in assenza di controllo della malattia.

Cosa significano i risultati?

Concentrazione: 0 - 25 IU / ml.

  • lupus eritematoso sistemico;
  • terapia efficace, remissione del lupus eritematoso sistemico;
  • La sindrome di Sjogren;
  • malattia mista del tessuto connettivo;
  • epatite cronica B e C;
  • cirrosi biliare primitiva;
  • mononucleosi infettiva.
  • mancanza di lupus eritematoso sistemico;
  • lupus eritematoso.

Cosa può influenzare il risultato?

  • La terapia efficace e il raggiungimento della remissione della malattia sono associati a bassi livelli di anti-dsDNA;
  • mancanza di controllo della malattia, esacerbazione della malattia, nefrite da lupus sono associati ad alti livelli di anti-dsDNA.

Note importanti

  • La mancanza di anti-dsDNA non preclude la diagnosi di "SLE".
  • La rilevazione di anti-dsDNA in un paziente senza segni clinici e altri criteri di questa malattia non viene interpretata a favore della diagnosi di "SLE".
  • L'anti-dsDNA è un marker specifico di SLE, ma può essere osservato in alcune altre malattie (epatite cronica B e C, malattie autoimmuni).

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Chi fa lo studio?

Reumatologo, dermatovenereologo, nefrologo, medico di famiglia.

Anticorpi al DNA ds

Gli anticorpi anti DNA ds (anti-dsDNA) sono un tipo di immunoglobuline antinucleari specifiche che interagiscono con molecole di DNA a doppio filamento. Gli anti-dsDNA sono specifici per il lupus eritematoso sistemico. Lo studio permette di diagnosticare questa patologia, valutare la sua attività, monitorare l'efficacia del trattamento. Principalmente prescritto per sintomi caratteristici, riprodotto a intervalli regolari almeno una volta ogni sei mesi. Il test viene eseguito mediante ELISA, il livello di anticorpi è determinato nel siero del sangue venoso. Normalmente, il risultato è negativo, il valore finale non supera 25 IU / ml. La tempistica dell'analisi è di 1 giorno.

Gli anticorpi anti DNA ds (anti-dsDNA) sono un tipo di immunoglobuline antinucleari specifiche che interagiscono con molecole di DNA a doppio filamento. Gli anti-dsDNA sono specifici per il lupus eritematoso sistemico. Lo studio permette di diagnosticare questa patologia, valutare la sua attività, monitorare l'efficacia del trattamento. Principalmente prescritto per sintomi caratteristici, riprodotto a intervalli regolari almeno una volta ogni sei mesi. Il test viene eseguito mediante ELISA, il livello di anticorpi è determinato nel siero del sangue venoso. Normalmente, il risultato è negativo, il valore finale non supera 25 IU / ml. La tempistica dell'analisi è di 1 giorno.

La morte cellulare programmata attiva il sistema immunitario - i macrofagi digeriscono i frammenti cellulari senza sviluppare l'infiammazione. In caso di fallimento di questo processo, non si verifica solo la fagocitosi, ma il trasferimento di informazioni sulle strutture della cellula deceduta come agenti alieni. Il sistema immunitario inizia la produzione di anticorpi contro i componenti del nucleo, l'apoptosi porta all'attivazione del sistema del complemento, lo sviluppo dell'infiammazione locale. Sullo sfondo dell'attività degli anticorpi al DNA ds, si forma la microvascolite, si manifestano i sintomi caratteristici del lupus eritematoso sistemico - sono interessati pelle, articolazioni, reni e altri organi. Il vantaggio del dosaggio anti-dsDNA è l'alta specificità (99%) in SLE, ma gli anticorpi sono prodotti solo nel 50-70% dei pazienti, pertanto è necessario un esame completo.

testimonianza

L'alta specificità dello studio restringe la gamma di indicazioni. L'analisi è assegnata nei seguenti casi:

  • Segni di malattia del tessuto connettivo. Gli stadi iniziali della collagenosi, un quadro clinico cancellato, manifestato da una lesione multisistemica, richiedono una diagnosi differenziale. Il test anti-dsDNA è usato per distinguere SLE da sclerodermia sistemica, dermatomiosite, artrite reumatoide.
  • Sintomi di SLE. Lo studio viene eseguito in presenza di lesioni cutanee sotto forma di farfalle eritema, eruzioni cutanee sul viso, avambracci, torace, dolori articolari, segni di polmonite, pericardite, epilessia, glomerulonefrite. Il rilevamento di AT consente di confermare la diagnosi.
  • La presenza di anticorpi antinucleari. Un risultato positivo del test, una luminescenza omogenea o granulare del nucleo quando si esegue l'RNIF è la base per lo scopo dello studio. Se non ci sono segni clinici di lupus eritematoso sistemico, si conclude che esiste un alto rischio di sviluppare la malattia nei prossimi anni.
  • La diagnosi di SLE. Il livello di anti-dsDNA riflette l'attività del processo patologico. Il test viene eseguito ogni 3-6 mesi, con forme gravi più spesso. I dati finali sono usati per fare una previsione, determinare lo stadio della malattia, monitorare l'efficacia della terapia.

Preparazione per l'analisi

Il sangue viene prelevato dalla vena cubitale al mattino. La preparazione per la procedura è standard:

  1. Dopo il pasto dovrebbe durare almeno 4 ore. Alla vigilia, dovresti escludere dalla dieta cibi grassi. Non è necessario modificare il regime di consumo, l'acqua pura non gassata può essere utilizzata senza restrizioni.
  2. Il giorno prima della procedura, è necessario evitare lo stress emotivo e fisico, abbandonare l'uso di bevande alcoliche.
  3. Sessioni di fisioterapia, procedure diagnostiche strumentali sono consentite dopo la donazione di sangue.
  4. Non fumare 30 minuti prima di entrare nella sala di trattamento.
  5. Verificare con il proprio medico l'effetto dei farmaci assunti sul valore del test finale.

Il sangue viene raccolto mediante venipuntura, immagazzinato e trasportato in tubi sigillati. Prima dell'esame, viene posto in una centrifuga, il fibrinogeno viene rimosso dal plasma risultante. Il siero è testato da ELISA. I dati sono preparati per 1 giorno lavorativo.

Valori normali

Il risultato normale è negativo. I valori di riferimento sono 0-25 IU / ml, lo stesso per bambini e adulti di entrambi i sessi. L'interpretazione tiene conto dei commenti:

  • L'assenza di anti-dsDNA non costituisce un motivo per escludere il SLE. Il 30-50% dei pazienti con questa malattia non ha anticorpi.
  • La normale velocità del test in combinazione con livelli elevati di anticorpi antinucleari e segni di lupus richiede l'esclusione della sindrome da lupus.
  • Durante il monitoraggio del LES, un risultato negativo conferma l'efficacia del trattamento, il raggiungimento della remissione, il basso rischio di esacerbazione.

aumento dei tassi

Gli anticorpi al DNA ds sono associati a lesioni autoimmuni della pelle, delle articolazioni e degli organi interni. I motivi per aumentare il punteggio finale del test includono:

  • Lupus eritematoso sistemico. Livelli aumentati di AT sono specifici per questa malattia (99%). I valori più alti sono determinati con una lunga assenza di controllo medico, esacerbazione, lupus nefrite.
  • Collagene. In meno del 10% dei casi, l'anti-dsDNA viene rilevato in pazienti con sindrome di Sjogren, malattia del tessuto connettivo misto, scleroderma e artrite reumatoide. I dati del test non vengono presi in considerazione quando si effettua una diagnosi e si monitorano le condizioni del paziente.
  • Infezione, patologia del fegato. Raramente, la causa dell'aumento è l'epatite B e C cronica, la cirrosi biliare primitiva, la mononucleosi infettiva, l'infezione da citomegalovirus.

declino

La diminuzione del tasso di ricerca nel monitoraggio di SLE indica l'efficacia delle misure correttive, la persistenza della remissione e il basso rischio di sviluppare nefrite da lupus. In altri casi, i valori bassi non hanno significato diagnostico.

Trattamento di anomalie

Il rilevamento degli anticorpi contro il DNA ds è un metodo altamente specifico e altamente sensibile per la rilevazione del lupus eritematoso sistemico. Queste analisi consentono una diagnosi differenziale, valutano il decorso della malattia e l'efficacia degli interventi terapeutici, fanno una previsione. I fattori fisiologici non influenzano la concentrazione di anticorpi, qualsiasi deviazione del valore dalla norma richiede l'interpretazione del medico curante - reumatologo, nefrologo, dermatologo.

Un esame del sangue per i marcatori di lupus eritematoso sistemico

saggi immunologici

Descrizione generale

Il lupus eritematoso sistemico (LES) è la più comune malattia autoimmune sistemica cronica, appartenente al gruppo di grandi collagenosi, che è caratterizzata da una diffusa lesione del tessuto connettivo e dei vasi sanguigni. La diagnosi precoce di questa patologia è un problema serio, poiché SLE può iniziare sotto la "maschera" di altre malattie. Poiché SLE è una malattia autoimmune, il meccanismo delle sue manifestazioni cliniche, secondo i concetti moderni, è spiegato dalle seguenti posizioni:

  • I complessi immunitari circolanti (CIC), che comprendono anticorpi anti-nucleari, essendo depositati nel collegamento microcircolatorio, portano allo sviluppo di vasculopatia e danno tissutale;
  • gli autoanticorpi verso le cellule del sangue portano a leucotomia, linfotrombopenia e anemia;
  • gli anticorpi antifosfolipidi portano allo sviluppo della sindrome antifosfolipidica (APS).

I moderni metodi di diagnostica immunologica di laboratorio permettono di identificare tutti i componenti della patogenesi del LES e quindi con un'insolita accuratezza quasi del 100% per verificare la diagnosi della malattia. Tuttavia, la presenza di eventuali cambiamenti nelle analisi consente loro di essere interpretati solo tenendo conto del quadro clinico individuale.

Va notato che il precedente metodo per la diagnosi di SLE dalla presenza di cellule LE nel sangue non ha resistito alla prova del tempo, mostrando sensibilità e specificità estremamente basse, e quindi è stato abbandonato. Le cellule LE non sono nemmeno incluse nel sistema di criteri SLE.

I principali indicatori di SLE sono:

Indicazioni per la nomina di un esame del sangue per i marcatori di lupus eritematoso sistemico

Come è la procedura?

Il prelievo di sangue viene effettuato dalla vena cubitale a stomaco vuoto al mattino.

Preparazione per l'analisi

8 ore prima dell'inizio dello studio, si raccomanda di escludere cibi grassi e fritti, così come l'alcol dalla dieta. Consentito di bere solo acqua naturale.

Lupus anticoagulante

Lupus anticoagulante (BA, Lupus anticoagulants, LA) è uno dei test di screening e di conferma importanti per la diagnosi di APS. Le BA sono formate nel corpo come risultato dello sviluppo di processi autoimmuni dopo effetti infettivi e sopprimono la reazione della protrombina alla trombina nel sangue. Quando questi anticorpi vengono rilevati nel sangue dall'allungamento dei test di coagulazione, vengono definiti come "lupus anticoagulante".


Decifrare il risultato dell'analisi

Fattore antinucleare

Fattore antinucleare sulla linea cellulare HEp-2 (ANP HEp-2, titoli, ANA IF, titoli). Un risultato ANF positivo è notato in oltre il 90% dei pazienti con LES e forme cutanee di questa malattia, sclerodermia, malattia del tessuto connettivo misto, sindrome di Sjogren. Il risultato della determinazione dell'ANF è un titolo, che è il valore della diluizione finale del siero, che mantiene una fluorescenza significativa del nucleo. Più alto è il denominatore della frazione, maggiore è la diluizione del siero, maggiore è il numero di anticorpi nel siero del paziente. La sensibilità di questo test per SLE è del 95%.

Anticorpi contro DNA a doppio filamento

Il sistema immunitario del corpo umano, è il guardiano della sua salute e sicurezza. Non appena un nemico penetra, si forma una risposta immunitaria, cioè una cellula che contatta l'alieno e la distrugge, sacrificando la sua vita, ma lasciandosi dietro i seguaci pronti a combattere questo nemico. Le violazioni in questo sistema semplificato causano gravi malattie che sono ancora incurabili.

Il rilevamento nel siero umano di un aumento del livello di IgG nel DNA a doppio filamento consente di riconoscere la presenza di una malattia autoimmune, monitorare lo sviluppo della malattia e l'efficacia del suo trattamento.

descrizione

Gli anticorpi a doppia elica dna sono rappresentanti di autoanticorpi prodotti dal sistema immunitario contro i nuclei delle cellule del loro stesso organismo. La presenza di queste proteine ​​nell'elica del DNA indica lo sviluppo di malattie che colpiscono il tessuto connettivo interno.

La caratteristica principale delle malattie autoimmuni, in cui le cellule del tessuto connettivo si autodistruggono, è la formazione di anticorpi antinucleari (ANA). Gli anticorpi al DNA sono una classe separata di proteine ​​che hanno la capacità di penetrare e distruggere i nuclei all'interno delle cellule.

Un tempo, ANA era diviso in due tipi principali:

  • Anticorpi contro istoni ed elica del DNA, questo include una proteina patologica prodotta dalla doppia elica del DNA, altrimenti anti-dsDNA.
  • Autoanticorpi agli antigeni nucleari estraibili. Il suo nome - estraibile o ENA, questi antigeni sono stati ottenuti a causa del fatto che erano isolati dai nuclei cellulari con soluzione fisiologica. Questi includono:
    • RNP,
    • Antigeni di Shegren A e B,
    • SCL-70 e PM-1.

La determinazione di un tipo specifico di anticorpi antinucleari in concomitanza con manifestazioni cliniche consente di stabilire quale specifica malattia autoimmune influisce sul paziente. Quindi, è stato rivelato che la rilevazione di numeri elevati nel sangue di anticorpi contro il DNA è caratteristica del lupus sistemico.

Il ruolo degli anticorpi contro il DNA nativo nello sviluppo del lupus eritematoso

Lupus eritematoso - lupus eritematoso, noto alla medicina dal 1828. Quindi il dermatologo francese Laurent Biett ha descritto per la prima volta le manifestazioni cutanee che appaiono con questo disturbo. Più tardi, gli scienziati hanno notato segni di violazione degli organi interni nei pazienti. E il famoso terapeuta inglese William Osler nel 1890 scoprì che in alcuni casi il lupus può procedere senza cambiamenti sulla pelle. Poi prima di praticare i medici c'era una domanda sulla possibilità di diagnosticare la malattia, basandosi non solo sui segni clinici.

Ma solo più di 50 anni dopo è stato scoperto il fenomeno delle cellule LE, in cui nel sangue si formano i leucociti, principalmente neutrofili contenenti particelle di nuclei fagocitati morti appartenenti a altre cellule. E nel 1954 nel siero dei pazienti scoprirono proteine ​​anormali del sistema immunitario, le cui azioni erano dirette contro i loro simili. È iniziata una nuova tappa nella storia dello studio del lupus sistemico. Ora i medici sono stati in grado di diagnosticare in modo affidabile la patologia nelle prime fasi, nonché di controllare lo sviluppo dei sintomi della malattia.

Principio di ricerca

Nella moderna pratica di laboratorio, la determinazione della presenza di anticorpi antinucleari, e in particolare di anti-dsDNA, utilizza un metodo di immunofluorescenza indiretta o un tipo di ricerca più sensibile - un saggio immunoenzimatico.

Per stabilire il tipo di malattia sistemica del tessuto connettivo interno e la differenziazione da altre malattie, è importante considerare la specificità dello studio. In molti casi, il plasma del paziente può contenere diversi tipi di proteine ​​aggressive e la maggior parte dei test sono progettati per confermare un solo tipo particolare. La specificità dell'analisi per la presenza di anticorpi al DNA a doppio filamento è del 99%, il che rende possibile diagnosticare il SLE con elevata precisione, anche se il test ANA ha mostrato risultati negativi.

Applicazione in medicina e genetica

E 'stato stabilito e confermato da studi che complessi costruiti da DNA nativo e immunoglobuline ad esso, come IgG e IgM, formano direttamente i sintomi caratteristici di questa malattia ed espressi nella distruzione dei tessuti di quasi tutti gli organi interni.

Le informazioni sulla presenza di agenti aggressivi nel sangue sono importanti per i pazienti la cui malattia si manifesta senza manifestazioni esterne. È possibile rilevare proteine ​​anomale nel DNA a doppio filamento diversi anni prima che compaiano i primi segni di distruzione nel corpo. Queste persone sono registrate e sottoposte a regolare esame da un reumatologo.

L'enorme valore dell'analisi per la presenza di cellule anormali nel DNA nativo gioca con il lupus neonatale. Questo tipo di malattia può svilupparsi nei neonati le cui madri soffrono di SLE o di altri disordini immunitari. Con questo test, i medici possono determinare il grado di rischio di sviluppare anomalie fetali e adottare misure tempestive per eliminarli.

Il pericolo di tale danno al corpo è il fallimento di un organo non specifico, ma della maggior parte dei sistemi corporei. Le proteine ​​aggressive danneggiano le articolazioni, la pelle, i vasi sanguigni e vari organi interni. Più spesso tali manifestazioni sono osservate nelle donne, secondo le statistiche, nove su dieci soffrono di donne, di età compresa tra 15 e 25 anni. Un tale difetto genetico porta ad un graduale, generale deterioramento della salute. I pazienti osservati:

Segni di lupus eritematoso

  • febbre;
  • arrossamento della pelle, soprattutto nel naso, nelle guance e nel décolleté;
  • la debolezza;
  • perdita di peso;
  • dolore muscolare;
  • spesso si manifesta la stomatite.
  • La patologia richiede un monitoraggio costante da parte del personale medico. Il risultato del suo trattamento dipende direttamente dall'incuria del processo patologico. Prima il paziente ha chiesto aiuto qualificato, maggiori sono le possibilità di ottenere una remissione stabile.

    La malattia è sempre di natura cronica, il suo corso è caratterizzato da periodi di esacerbazioni e remissione. Questo si riflette chiaramente nella concentrazione di proteine ​​aggressive. Un numero elevato confermerà l'attività del processo patologico, e una diminuzione del titolo indica una pausa temporanea. Sebbene nella medicina russa sia consuetudine distinguere il decorso del LES da quelli acuti e cronici, gli studi stranieri dimostrano che la malattia rimane incurabile oggi.

    Indicazioni per l'uso e lo scopo dello studio.

    Si raccomanda vivamente di verificare la presenza di proteine ​​aggressive in questi casi:

    • presenza di segni clinici di lupus sistemico:
      • arrossamento caratteristico della pelle sulle spalle e sul viso,
      • dolore articolare periferico,
      • segni di insufficienza renale
      • convulsioni epilettiche.
    • Rilevazione di anticorpi antinucleari in un esame del sangue.
    • Per controllare il decorso asintomatico della malattia.

    Lo scopo principale di rilevare gli anticorpi contro il DNA a doppio filamento è la diagnosi differenziale di malattie diffuse di altro tipo. Oltre a valutare l'efficacia del trattamento.

    Come ogni altra malattia, il lupus richiede attenzione e trattamento sistematico. E, nonostante il fatto che la patologia sia piuttosto grave con lesioni multiple dei sistemi interni del corpo, è del tutto possibile combatterla. Diagnosi tempestiva mediante l'analisi della presenza di anti-dsDNA, consente di monitorare lo sviluppo di sintomi patologici e con cure mediche competenti e tempestive, i pazienti possono condurre una vita piena. La cosa principale è credere e soddisfare incondizionatamente tutte le raccomandazioni del medico curante.

    Anticorpi contro DNA a doppio filamento (ds-DNA)

    Ricerca di alfabeto

    Cos'è l'anticorpo a doppio filamento (ds-DNA)?

    Anticorpi contro DNA nativo a doppio filamento (ANTI-DNA, anti-dsDNA, Anticorpi contro il DNA) è un marker altamente specifico del lupus eritematoso sistemico.

    Il test anti-dsDNA è una determinazione quantitativa immunometrica di autoanticorpi a DNA a doppia elica (nativo). È uno dei tipi di anticorpi diretti contro le strutture del nucleo della cellula. L'anti-dsDNA viene rilevato durante la fase attiva del lupus eritematoso sistemico. I livelli di questi anticorpi sono correlati alla gravità della malattia e alla presenza di glomerulonefrite. Questo test può essere utilizzato per monitorare il trattamento di questa malattia. Anticorpi al DNA possono anche essere presenti in altri tipi di patologie del tessuto connettivo. L'uso complesso della definizione di anticorpi anti-DNA a doppio filamento e anticorpi anti-antigeni nucleari estratti (ASA) aumenta la sensibilità dell'esame di laboratorio di pazienti con lupus eritematoso sistemico.

    Un rilevamento una volta potenziato degli anticorpi contro il DNA a doppio filamento consente una conclusione diagnostica, ma non prognostica. L'assenza di una diminuzione del livello di anticorpi o del suo aumento è un segno prognostico sfavorevole. La riduzione del livello predice la remissione e talvolta un esito letale. Gli anticorpi possono scomparire con la remissione della malattia.

    Perché è importante creare anticorpi a doppio filamento (ds-DNA)?

    Diagnosi e monitoraggio del lupus eritematoso sistemico (LES).

    Quali malattie producono anticorpi a doppio filamento (ds-DNA)?

    Come prepararsi per la consegna di DNA Anticorpi a doppio filamento (ds-DNA)?

    Materiale per la consegna di anticorpi a doppio filamento al DNA (ds-DNA)

    Durata degli anticorpi al DNA a doppio filamento (ds-DNA)

    Elevazioni della norma sono osservate nelle seguenti malattie Anticorpi a DNA a doppio filamento (ds-DNA)

    Quali medici dovrebbero essere consultati per il DNA a doppio filamento (ds-DNA) per la consulenza Antitel?

    • Un immunologo;
    • terapeuta;
    • Neurologo.

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    Analisi> Determinazione del contenuto nel sangue di anticorpi IgG sul DNA a doppia elica (nativo)

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    Anticorpi contro DNA a doppio filamento

    Gli anticorpi anti DNA a doppia elica o anticorpi anti-dsDNA sono un gruppo eterogeneo di anticorpi contro DNA a doppio filamento, un marker di laboratorio del lupus eritematoso sistemico.

    Gli anticorpi anti-dsDNA sono

    autoanticorpi contro il DNA situato all'interno del nucleo. La ragione esatta per la loro comparsa nel sangue non è stata stabilita.

    Il sistema immunitario umano produce anticorpi - proteine ​​speciali che combattono virus, batteri, funghi, vari parassiti - cioè, tutto ciò che è geneticamente diverso dal suo. Il compito di ogni anticorpo è distruggere il materiale estraneo e non toccare le cellule native (il meccanismo dell'autotolleranza).

    In alcuni casi, la risposta immunitaria è diretta non contro l'estraneo, ma contro le sue stesse cellule e tessuti. In questo caso, parla dello sviluppo di una malattia autoimmune. E gli anticorpi prodotti dalle loro cellule o dai loro componenti sono chiamati autoimmuni.

    In caso di grave scompenso nell'immunità, il livello di autoanticorpi diventa elevato e sufficiente per una diagnosi.

    Gli anticorpi del DNA a doppio filamento non sono un anticorpo, ma un intero complesso di anticorpi, il loro bersaglio è il DNA dal nucleo cellulare.

    Il test degli anticorpi per il DNA a doppio filamento è altamente sensibile per la diagnosi di lupus eritematoso sistemico, vale a dire un risultato positivo conferma la diagnosi. Gli anticorpi anti-dsDNA sono rilevati nel 70-80% dei pazienti. Tuttavia, la mancanza di sensibilità dello studio richiede cautela nella lettura del risultato dell'analisi (cioè, un risultato negativo non esclude la diagnosi di lupus eritematoso sistemico).

    Lupus eritematoso sistemico

    Il lupus eritematoso sistemico è una grave malattia autoimmune con danni a diversi organi e sistemi - la pelle, le articolazioni, il cuore, i vasi sanguigni, i reni e il cervello. Non necessariamente la presenza simultanea di sintomi da tutti questi organi. Il lupus è molto vario nelle sue manifestazioni, in un paziente il rene può prevalere, e in un altro - i sintomi della pelle.

    Fattori di rischio

    • predisposizione genetica - come evidenziato dalla presenza di bassi livelli di autoanticorpi e alcuni antigeni del sistema HLA nei parenti di pazienti con lupus eritematoso sistemico
    • infezione virale - avvia il processo autoimmune
    • irradiazione solare - raggi ultravioletti, che portano all'apoptosi delle cellule della pelle, "espongono" il DNA e lo rendono visibile al sistema immunitario
    • farmaci - procainamide, idralazina, metildopa
    • cambiamenti ormonali (mestruazioni, gravidanza, parto), causati da estrogeni e prolattina, che spiega la maggiore incidenza della malattia tra le donne (90%)

    sintomi

    • manifestazioni comuni - debolezza e stanchezza, dolore nei muscoli, articolazioni, perdita di peso, febbre, aumento dei linfonodi
    • artrite e artralgia - infiammazione e dolore delle articolazioni delle mani, ginocchia, polsi, immagine a raggi X dell'articolazione intorno a una diminuzione della densità ossea (osteoporosi periarticolare), ma senza erosioni
    • eruzione della farfalla e altre eruzioni cutanee
    • fotosensibilità - i sintomi peggiorano dopo l'esposizione al sole
    • sierosi - infiammazione delle membrane sierose del cuore, polmoni (pericardite, pleurite)
    • danno renale (lupus nefrite) - ridotta funzionalità renale e una triade di sintomi di laboratorio
    1. proteinuria - perdita di proteine ​​nelle urine superiore a 0,5 g / die (100%)
    2. microembruria - globuli rossi nel sedimento urinario (80%)
    3. Sindrome nefritica (45-65%)

    Raramente nelle urine appare un numero significativo di leucociti (piuria) in assenza di infezione del tratto urinario.

    • danno polmonare - polmonite da lupus acuto - associazione di febbre, tosse con infiltrati alveolari chiari
    • manifestazioni neuropsichiatriche - dalla depressione a parossismi epilettiformi, disturbi visivi e psicosi
    • papilla del nervo ottico e focolai vatoobraznye sulla retina

    Il rilevamento degli anticorpi contro il DNA a doppio filamento nel sangue di un paziente con lupus eritematoso sistemico richiede un monitoraggio ripetuto dopo 1-3-6-12 mesi, a seconda della gravità della malattia. Tali pazienti hanno un aumentato rischio di sviluppare nefrite da lupus, poiché i complessi anti-dsDNA con complessi immunitari danneggiano i reni.

    Indicazioni per l'analisi degli anticorpi anti-dsDNA

    • se sospetti una malattia autoimmune sistemica
    • con sintomi di lupus eritematoso sistemico
    • diagnosi differenziale della sindrome articolare
    • controllo del lupus eritematoso sistemico
    • previsione dello sviluppo del lupus jade
    • con un test anticorpale positivo
    • se si sospetta una malattia sistemica, in particolare il lupus eritematoso sistemico
    • con un risultato positivo dello studio degli anticorpi antinucleari, anticorpi ENA
    • per prevedere il successo del trattamento

    Quali sintomi vengono analizzati?

    • artrite - infiammazione dell'articolazione, manifestata da dolore, gonfiore, mobilità ridotta, arrossamento della pelle e aumento della temperatura su di esso
    • pericardite o pleurite di origine sconosciuta
    • malattie della genesi immunitaria del rene o cambiamenti nei risultati dell'analisi delle urine (proteinuria, ematuria)
    • anemia emolitica - distruzione dei globuli rossi con aumento dei livelli di bilirubina nel sangue e nelle urine
    • trombocitopenia: un numero ridotto di piastrine nel sangue
    • neutropenia - un numero ridotto di neutrofili nella formula dei leucociti
    • sintomi della pelle - eruzioni cutanee, ispessimento della pelle, soprattutto dopo l'esposizione attiva al sole
    • La sindrome di Raynaud - un cambiamento periodico nel colore dei piedi e delle mani (pallore, bluore e arrossamento) con compromissione della sensibilità e del dolore
    • sintomi neurologici e mentali atipici
    • febbre, affaticamento, perdita di peso, linfonodi ingrossati

    norma

    Normalmente, gli anticorpi al DNA a doppio filamento nel sangue non vengono rilevati.

    Gli standard digitali dipendono dai sistemi di test utilizzati. I test per gli autoanticorpi devono essere eseguiti nello stesso laboratorio.

    Ulteriori ricerche

    • emocromo completo
    • Analisi delle urine
    • test di funzionalità epatica - bilirubina, AST, ALT, GGT, fosfatasi alcalina
    • test reumatici - proteina C-reattiva, velocità di sedimentazione eritrocitaria, fattore reumatoide, ASLO
    • ACCP - anticorpi al peptide citrullina
    • ANA - anticorpi antinucleari
    • anticorpi anti-Sm
    • anticorpi anti-nRNP
    • anticorpi anti-SCL-70
    • anticorpi anti-SSA e anti-SSB
    • anticorpi antihistone
    • anticorpi anti-centromerici
    • anticorpi anti-sp100
    • beta 2-microglobulina

    Cause degli anticorpi anti-dsDNA

    • lupus eritematoso sistemico - un risultato positivo dello studio è un criterio per la diagnosi
    • lupus eritematoso sistemico farmaco-indotto
    • Sindrome di Sjogren
    • Sindrome di Sharpe (malattia del tessuto connettivo misto)
    • artrite reumatoide - sono presenti in rari casi, scompaiono in caso di successo del trattamento; Gli anticorpi Abti-dsDNA possono comparire dopo trattamento con farmaci anti-TNP-alfa (adalimumab, infliximab, etanercept) - temporaneamente; associato ad un aumentato rischio di sindrome del lupus
    • sclerodermia sistemica
    • epatite B
    • epatite C
    • cirrosi biliare primitiva
    • mononucleosi infettiva
    • infezione da citomegalovirus
    • HIV
    • infezione da parvovirus
    • mieloma multiplo

    Domande al dottore

    1. Devo essere testato per anti-dsDNA se non ho anticorpi anti-nucleari?

    No, devi fare l'analisi. Gli anticorpi anti-nucleari possono essere negativi nei pazienti con lupus eritematoso sistemico e anti-dsDNA positivo.

    2. Con anti-dsDNA positivo, ho ANA negativo. Quindi non ho il lupus eritematoso sistemico?

    I risultati di qualsiasi test di laboratorio, e per le malattie autoimmuni sistemiche - in particolare, dovrebbero essere valutati solo in modo completo. I sintomi vengono prima, seguiti da test di laboratorio. Alcuni pazienti con lupus eritematoso sistemico hanno anti-dsDNA positivo e ANA negativo. L'algoritmo di decrittografia semplificato è il seguente:

    • anti-dsDNA positivo - criterio per la diagnosi di lupus eritematoso sistemico
    • anti-dsDNA negativo - non confermare l'assenza della malattia

    3. Ho il lupus eritematoso sistemico. Gli anticorpi contro il doppio filamento di DNA spariscono mai dal mio sangue?

    No. Il loro livello può aumentare e diminuire a seconda del successo del trattamento e dello stile di vita. In quantità minime, l'anti-dsDNA sarà nel sangue durante la remissione e si verificherà un massimo durante l'esacerbazione.

    4. Ho rilevato anticorpi contro il DNA a doppio filamento, ma allo stesso tempo mi sento bene, non ci sono sintomi di lupus eritematoso sistemico. È possibile?

    Sì. Piccole quantità di anti-dsDNA possono essere rilevate nel sangue di persone sane. Ma questo fenomeno è temporaneo, gli anticorpi sono rappresentati da immunoglobuline M con bassa avidità (il grado di resistenza del composto di antigene e anticorpo) e non IgG con elevata avidità, come nel lupus eritematoso sistemico.

    Anticorpi contro il DNA a doppio filamento di IgG

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    • Codice di studio: 336
    • Termine d'esecuzione: fino a 7 giorni
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    Anticorpi contro DNA a doppio filamento, anti-DNA, anticorpi contro il DNA nativo

    Gli anticorpi contro il DNA a doppio filamento sono autoanticorpi diretti contro il loro DNA a doppio filamento; rilevato con lupus eritematoso sistemico. Il loro studio è effettuato a scopi diagnostici, oltre a valutare l'attività e monitorare il trattamento di questa malattia.

    Gli anticorpi del DNA a doppio filamento (o anti-dsDNA) appartengono al gruppo dei cosiddetti anticorpi antinucleari - autoanticorpi diretti contro i componenti dei propri nuclei cellulari. Se gli anticorpi antinucleari sono comuni a molte malattie che si trovano nel gruppo delle cosiddette malattie diffuse del tessuto connettivo, allora gli anti-dsDNA sono considerati anticorpi specifici contro il lupus eritematoso sistemico (o LES). Il rilevamento degli anticorpi contro il DNA a doppio filamento è uno dei criteri necessari per la diagnosi del lupus eritematoso sistemico. Il rilevamento di dsDNA è possibile usando il metodo di immunoassay enzimatico. Una sensibilità molto elevata del metodo (dell'ordine del 100%) è necessaria nel caso dello studio di campioni biologici con un basso contenuto di anticorpi. Tenendo conto del fatto che ci sono diversi tipi di autoanticorpi nel sangue di persone che soffrono di malattie sistemiche del tessuto connettivo, così come il fatto che la distinzione diagnostica tra queste patologie si basa spesso sulla rilevazione di un particolare tipo di anticorpi la ricerca è estremamente importante per prendere in considerazione l'alta specificità. La specificità dello studio sull'anti-dsDNA raggiunge circa il 99,2%, rendendo questo studio prezioso e indispensabile per la diagnosi differenziale del lupus eritematoso sistemico.

    Anti-dsDNA rilevato nell'ordine del 50-70% delle persone al momento della diagnosi "SLE". Si ritiene che complessi immunitari rappresentati da DNA a doppio filamento e anticorpi specifici (IgG e IgM) siano coinvolti nello sviluppo della microvascolite, causando la comparsa di sintomi intrinseci del LES sotto forma di lesioni della pelle, reni, articolazioni e un certo numero di altri organi. Gli anticorpi anti-DNA a doppio filamento sono così caratteristici del lupus eritematoso sistemico che possono riconoscere questa patologia anche in caso di esito negativo di uno studio di screening per la presenza di anticorpi antinucleari. Tuttavia, va notato che l'assenza di anticorpi contro il DNA a doppio filamento non esclude la presenza di lupus eritematoso sistemico.

    Il rilevamento di anticorpi contro il DNA a doppio filamento in una persona senza sintomi clinici e altri criteri di questa patologia non è interpretato a favore del lupus eritematoso sistemico, ma tali persone sono a rischio di sviluppare SLE in futuro. Inoltre, devono essere osservati da un reumatologo, poiché la comparsa di anticorpi può precedere la comparsa della malattia per diversi anni.

    Il livello di anti-dsDNA può variare a seconda delle caratteristiche del decorso della malattia. Di solito, un titolo anticorpale alto indica un'attività ad alto SLE, mentre una bassa indica il raggiungimento della remissione. Per questo motivo, la misurazione del contenuto di anti-dsDNA viene utilizzata per controllare la terapia e per prevedere la malattia. L'aumento del titolo anticorpale nel DNA a doppio filamento indica una mancanza di controllo della malattia, la sua progressione e, inoltre, indica la possibilità della formazione della cosiddetta nefrite del lupus. Al contrario, il titolo costantemente basso è un buon segno prognostico. Dovrebbe essere riconosciuto che tale correlazione non è sempre nota. Il titolo anticorpale al DNA a doppio filamento viene misurato regolarmente, con una frequenza di ogni 3-6 mesi, con una lieve gravità della malattia ea intervalli più brevi in ​​assenza di controllo sulla malattia, con la selezione del trattamento, durante la gravidanza o nel periodo postpartum.

    Separatamente, dovrebbe essere annotata una sindrome clinica speciale - lupus di droga. Questa patologia, nonostante la forte somiglianza delle sue manifestazioni cliniche con il lupus eritematoso sistemico, ha, tuttavia, diverse caratteristiche distintive. Quindi, è provocato dall'uso di farmaci (ad esempio, procainamide, litio, idralazina, clorpromazina, propiltiouracile e un numero di altri), scompare completamente dopo che sono stati cancellati; gli organi interni sono raramente coinvolti nel processo; ha una prognosi relativamente più favorevole, meno comunemente associata alla presenza di anti-dsDNA. Per questo motivo, con un risultato negativo di uno studio su questi anticorpi in una persona con sintomi clinici di lupus autoimmune, nonché con la presenza di fattore antinucleare, è necessario escludere il lupus della droga.

    Nonostante il tipico titolo alto di anticorpi contro il DNA a doppio filamento per il lupus eritematoso sistemico, il loro basso contenuto è anche rilevato nel sangue di individui e con una serie di altre malattie del tessuto connettivo diffuse (ad esempio, con malattia del tessuto connettivo misto, sindrome di Sjogren). Inoltre, lo studio può dare un risultato positivo nei pazienti con epatite cronica B, C, nonché cirrosi biliare primitiva, mononucleosi infettiva.

    Il gruppo di autoanticorpi nel lupus eritematoso sistemico comprende anche altri anticorpi antinucleari (per esempio, anti-Sm, RNP, SS-A), anti-plasma e anticorpi antifosfolipidi. Identificandoli nel sangue del paziente con i sintomi clinici del lupus eritematoso sistemico insieme agli anticorpi del DNA a doppio filamento contribuisce anche alla diagnosi. Inoltre, la determinazione degli anticorpi contro il DNA a doppio filamento dovrebbe essere integrata da alcuni studi clinici generali.

    30 minuti prima di prendere il sangue smette di fumare.

    Solo alcuni dei processi, condizioni e malattie in cui lo scopo della nomina di questa analisi.

    È possibile condurre uno studio sugli anticorpi contro il DNA a doppio filamento per identificare, valutare l'attività e monitorare il trattamento del lupus eritematoso sistemico; ai fini della differenziazione diagnostica delle malattie del tessuto connettivo diffuse.

    Di seguito sono riportati solo alcuni dei possibili processi, condizioni e malattie in cui vengono rilevati gli anticorpi al DNA a doppio filamento. Va ricordato che il risultato di uno studio potrebbe non essere sempre un criterio sufficientemente specifico e sufficiente per formulare una conclusione. Le informazioni fornite non servono in alcun modo allo scopo di autodiagnosi e autotrattamento. La diagnosi finale è stabilita solo da un medico quando si combinano i dati ottenuti con i risultati di altri metodi di ricerca.

    Possibili cause di un risultato negativo: il lupus eritematoso sistemico è assente; C'è la droga del lupus.

    Possibili cause di un risultato positivo con presenza di titoli anticorpali elevati: lupus eritematoso sistemico.

    Possibili cause di un risultato positivo con presenza di un titolo anticorpale basso: trattamento efficace, fase di remissione del LES; malattia mista del tessuto connettivo; La sindrome di Sjogren; cirrosi biliare primitiva; epatite cronica B, C; mononucleosi infettiva.

    Fattori che possono influenzare l'esito dello studio

    trattamento efficace e raggiungimento della fase di remissione della patologia sono combinati con un basso titolo anticorpale;

    mancanza di controllo sulla malattia, il suo peggioramento, la presenza di lupus nefrite combinata con un alto titolo di anticorpi.

    L'assenza di anticorpi contro il DNA a doppio filamento non esclude la diagnosi di lupus eritematoso sistemico.

    La rilevazione di anticorpi contro il DNA a doppio filamento in una persona senza sintomi clinici e altri criteri di questa patologia non viene interpretata a favore della diagnosi di lupus eritematoso sistemico.

    L'anti-dsDNA è un marker specifico di SLE, ma possono anche essere osservati in una serie di altre malattie (ad esempio, malattie autoimmuni, epatite cronica B, C).

    1. Anticorpi al DNA

    a. Metodi di rilevamento Gli anticorpi verso nDNA possono essere rilevati usando la reazione di fissazione del complemento, la reazione di agglutinazione delle particelle di bentonite rivestite con DNA, il metodo di immunodiffusione e altri metodi immunologici. Il metodo più comunemente usato è basato sul legame degli anticorpi al DNA marcato con 125 I. L'essenza del metodo è la seguente: 1) il siero di test e controllo (normale) è miscelato con una soluzione di DNA marcata con 125 I; 2) per precipitare i complessi risultanti (IgG - DNA), si aggiungono anticorpi a IgG o al 50% di solfato di ammonio al siero (vedere Fig. 15.3). Nel siero di controllo, il 10-20% del DNA precipita. Se più DNA viene precipitato nel siero del test rispetto al controllo, aumenta il contenuto di anticorpi verso l'nDNA nel siero del test. Questo indica grave nefrite o lupus nefrite. Gli anticorpi all'nDNA possono anche essere rilevati usando DNA Crithidia lucillae (rappresentante flagellato). Sebbene questo metodo sia abbastanza sensibile, non consente di valutare il titolo anticorpale del DNA, pertanto, non viene utilizzato per valutare l'attività di SLE.

    b. Significato diagnostico Gli anticorpi anti nDNA sono caratteristici della nefrite da lupus e di altre gravi manifestazioni di SLE. La rilevazione seriale degli anticorpi contro il DNA viene utilizzata per valutare l'efficacia del trattamento di questa malattia. Sebbene la determinazione degli anticorpi contro il DNA sia meno sensibile della determinazione degli anticorpi antinucleari mediante immunofluorescenza, presenta i seguenti vantaggi: 1) gli anticorpi contro l'nDNA sono più specifici per il LES rispetto ad altri anticorpi antinucleari; 2) il rischio e la gravità della nefrite da lupus possono essere valutati dal livello di questi anticorpi (con un aumento del titolo anticorpale verso il DNA, aumento del rischio e della gravità della nefrite da lupus). È necessario tener conto del fatto che i preparati commerciali del DNA contengono non solo molecole a doppio filamento, ma a filamento singolo, e anticorpi a DNA a filamento singolo sono rilevati nella sclerodermia sistemica, nell'artrite reumatoide, nella dermatomiosite, nell'epatite cronica attiva e nella sindrome del lupus indotto da farmaci procainamide, hydralazine, isoniazide, trimethadione, metildofy e fenotiazine. Il DNA a filamento singolo può essere rimosso mediante cromatografia. Se ci sono dubbi sui risultati dello studio, è necessario verificare la purezza della preparazione del DNA utilizzata.

    a. Ruolo nella patogenesi delle malattie autoimmuni. Gli anticorpi al DNA si trovano nei reni (come complessi immuni) e nel siero dei pazienti con LES. Poiché questi anticorpi si legano e attivano il complemento, contribuiscono alla distruzione delle cellule e attivano neutrofili e macrofagi.

    2. Anticorpi agli antigeni nucleari estraibili

    a. Definizione. Alcuni antigeni nucleari, a differenza del DNA, sono facilmente estratti con soluzioni saline (vedi Tabella. 15.3). Gli antigeni nucleari estraibili includono l'antigene Sm (da Smith è il nome di un paziente con SLE, che ha identificato per primo questo antigene), ribonucleoproteina (a differenza dell'antigene Sm, è scisso da ribonucleasi e tripsina), antigeni Ro / SS-A e La / SS -B.

    b. Metodi di rilevamento Gli anticorpi agli antigeni nucleari estraibili possono essere determinati usando il metodo descritto in Ch. 15, pagina II.G.2.b. Se il siero del test contiene anticorpi contro antigeni nucleari estraibili, allora l'intensità della luminescenza delle sezioni tissutali dopo l'estrazione di antigeni con soluzione salina sarà inferiore rispetto a prima dell'estrazione. Un altro modo per rilevare questi anticorpi è basato sulla precipitazione degli antigeni nucleari estratti con il siero da analizzare nel gel (metodo di immunodiffusione). Viene utilizzato anche un metodo di immunofluorescenza indiretta, basato sull'uso di antigene puro: 1) una goccia di soluzione di antigene viene applicata su un vetrino e asciugata, 2) la colorazione viene trattata con il siero da testare (si utilizza come controllo il siero normale) e quindi etichettata fluoresceina anticorpi anti-IgG umani, 3) un eccesso di anticorpi marcati viene rimosso mediante lavaggio. La fluorescenza diventa evidente quando il vetro viene illuminato con luce ultravioletta: se solo la macchia trattata con il siero in esame è illuminata, significa che contiene anticorpi agli antigeni estratti.

    a. Valore diagnostico

    1) Gli anticorpi anti-Sm sono molto specifici per SLE, ma il loro livello non riflette la gravità della malattia. Questi anticorpi vengono rilevati mediante immunodiffusione nel 25-30% e utilizzando l'ELISA in fase solida nel 50-60% dei pazienti con LES. La presenza nel siero del paziente di anticorpi anti-antigene Sm è inclusa nei criteri per il LES, adottata dall'American Rheumatological Association e conferma la diagnosi di SLE.

    2) Anticorpi contro la ribonucleoproteina. Con il metodo della doppia immunodiffusione radiale (vedi Ch. 20, pag. I.B.) questi anticorpi sono rilevati nel 30% dei pazienti con LES. Gli anticorpi anti-antigene Sm vengono in genere rilevati simultaneamente. Un significativo aumento del titolo di anticorpi contro la ribonucleoproteina (fino a 1:10 000) è caratteristico di una malattia mista del tessuto connettivo. La presenza di anticorpi contro la ribonucleoproteina nel siero è un criterio diagnostico per una malattia mista del tessuto connettivo. In altre malattie autoimmuni (artrite reumatoide, sindrome di Sjogren, sclerodermia sistemica, polimiosite) gli anticorpi contro la ribonucleoproteina sono rilevati raramente (vedere Tabella. 15.3).

    3) Anticorpi contro antigeni Ro / SS-A e La / SS-B. In precedenza, il metodo della doppia immunodiffusione radiale è stato utilizzato per determinare gli anticorpi contro questi antigeni, ora è un ELISA in fase solida più accurato. Gli anticorpi verso gli antigeni Ro / SS-A e La / SS-B sono rilevati nel 70% dei pazienti con sindrome di Sjogren (sia primaria che secondaria). Gli anticorpi anti-Ro / SS-A sono anche determinati in caso di LES (nel 40% dei pazienti), compreso il lupus eritematoso cutaneo subacuto (75%), caratteristica cutanea del lupus eritematoso nei neonati le cui madri hanno SLE (90%), blocco AV congenito (60%) e altre malattie autoimmuni (10-20%): sindrome felina, scleroderma sistemico, polimiosite, cirrosi biliare primitiva.

    3. Anticorpi anti-centromerici. Nella maggior parte dei laboratori, lo studio degli anticorpi antinucleari comprende la determinazione degli anticorpi anti-centromerici. Nella determinazione degli anticorpi anti-centromerica mediante il metodo dell'immunofluorescenza indiretta, non delle sezioni di tessuto, ma viene utilizzata la coltura di cellule umane con HEp-2 (caratterizzata da macchie spotty). Gli anticorpi anti-centromerici sono solitamente rilevati in malattie che coinvolgono la sindrome di Raynaud, scleroderma sistemico e SLE, e occasionalmente in polimiosite, dermatomiosite e cirrosi biliare primitiva. Mentre la rilevazione di anticorpi contro l'antigene Scl-70 nella sclerodermia sistemica è un segno prognostico scarso, la rilevazione di anticorpi anti-centromerici in questa malattia indica una prognosi favorevole. In questo caso, gli organi interni non sono influenzati o leggermente influenzati.

    4. Anticorpi contro gli istoni. Utilizzando immunoblotting, RIA e ELISA in fase solida, è possibile identificare 5 tipi di istoni. Gli anticorpi verso gli istoni H1 e H2B sono rilevati nel 60% dei pazienti con LES. Con la sindrome da lupus da farmaci causata da procainamide e hydralazine, gli anticorpi contro gli istoni H2A, H2B, H3 e H4 sono rilevati in più del 90% dei pazienti. Rileva anche anticorpi contro il DNA a filamento singolo e anticorpi antinucleari (quest'ultimo - con metodo di immunofluorescenza).

    5. Altri anticorpi antinucleari. Gli anticorpi contro gli antigeni Pm-1 e Scl-70 (DNA topoisomerasi I) sono rilevati nel 25-30% dei pazienti con sclerodermia sistemica e sono specifici per questa malattia. Gli anticorpi diretti contro l'antigene Pm-1 sono generalmente rilevati nella sclerodermia sistemica, accompagnata da miosite e nella dermatomiosite, anticorpi contro l'antigene Scl-70 nello scleroderma sistemico con lesioni cutanee diffuse. Nella sclerodermia sistemica con miosite si rilevano anche anticorpi diretti contro antigeni Jo-1 (istidil-tRNA sintetasi), Ku e ribonucleoproteine. Quando lo scleroderma sistemico è anche anticorpi determinati agli antigeni dei nucleoli (RNA polimerasi I e fibrillina), ma non hanno valore diagnostico.

    6. Altri autoanticorpi sono anche determinati mediante immunofluorescenza indiretta. Questi anticorpi, di regola, non sono specifici e vengono rilevati in varie malattie, ma in combinazione con altri indicatori spesso aiutano a formulare una diagnosi.

    a. Anticorpi a diversi tipi di cellule e componenti del citoplasma. Di seguito sono riportati alcuni di questi anticorpi e malattie in cui vengono rilevati: anticorpi alle cellule della corteccia surrenale nell'insufficienza surrenalica primaria, anticorpi ai mitocondri nella cirrosi biliare primitiva, anticorpi ai neuroni nel LES con danno al SNC, anticorpi alle cellule di obklodochnyh nella gastrite autoimmune, anticorpi anti-ribosoma della proteina P in LES, in particolare con danno al sistema nervoso centrale e alla pelle, anticorpi per levigare le cellule muscolari in epatite cronica attiva, anticorpi anti-antigeni della tiroide microsomiale Quando diffondere gozzo tossico e tiroidite linfocitica cronica.

    b. Anticorpi antifosfolipidi. Gli anticorpi anti-cardiolipina, rilevati nella reazione di precipitazione plasmatica con l'antigene cardiolipinico e l'uso di ELISA in fase solida, nonché del lupus anticoagulante, sono di importanza clinica. Anticorpi antifosfolipidi insieme a anticorpi anti DNA e antigene Ro / SS-A sono spesso rilevati in SLE e nella sindrome antifosfolipidica primaria e indicano un alto rischio di trombosi arteriosa e venosa, trombocitopenia e aborto spontaneo abituale. La reazione di precipitazione plasmatica con un antigene di cardiolipina è un metodo informativo e poco costoso per diagnosticare la sindrome antifosfolipidica primaria. Quando si verifica una reazione positiva di precipitazione plasmatica con un antigene cardiolipinico, il lupus anticoagulante e l'IgG cardiolipina vengono spesso rilevati nel siero dei pazienti. Il titolo di IgG per la cardiolipina viene determinato usando l'ELISA in fase solida. Si ritiene che il suo aumento nella sindrome antifosfolipidica primaria aumenti il ​​rischio di complicanze e indichi una prognosi infausta. Altri anticorpi contro la cardiolipina (IgA e IgM) non hanno valore prognostico. È possibile sospettare la presenza di lupus anticoagulante nel siero sulla base dei seguenti indicatori: 1) un aumento dell'APTT, che non è suscettibile di correzione aggiungendo fosfolipidi o miscelando il plasma in studio con il normale; 2) un aumento del tempo di coagulazione con l'aggiunta di caolino e fosfolipidi, 3) un aumento del tempo di coagulazione della rettilasi. Secondo alcuni ricercatori, la presenza di lupus anticoagulante è un sintomo più specifico della sindrome antifosfolipidica rispetto alla presenza di IgG in cardiolipina. È noto che nella patogenesi delle complicanze tromboemboliche della sindrome antifosfolipidica, l'attivazione dei fattori della coagulazione, l'interazione degli anticorpi con i fosfolipidi con l'endotelio e la violazione della funzione piastrinica giocano un ruolo. Tuttavia, non è completamente compreso.

    a. Autoanticorpi rilevati nella vasculite sistemica

    1) Anticorpi al citoplasma dei neutrofili. Per determinare questi anticorpi, viene utilizzato un metodo di immunofluorescenza che utilizza l'etanolo fissato con neutrofili come substrato cellulare. Esistono 2 tipi di anticorpi contro il citoplasma dei neutrofili: anticorpi contro la proteasi 3 e anticorpi contro la mieloperossidasi. Gli anticorpi anti citoplasma dei neutrofili sono essenziali nella diagnosi differenziale di vasculite verificano con lesioni dei polmoni e reni: anticorpi al proteasi identificato 3 granulomatosi di Wegener (90% dei pazienti), anticorpi anti-mieloperossidasi - in alcune forme di primaria rapidamente glomerulonefrite progressiva, e malattie infiammatorie croniche. Anticorpi al citoplasma dei neutrofili sono spesso rilevati nella periarterite nodosa con lesioni dei piccoli vasi - una forma di periarterite nodosa in cui non sono rilevati complessi immunitari - e altre vasculiti sistemiche.

    2) Anticorpi alla membrana basale glomerulare. Gli anticorpi anti-collagene di tipo IV, che fanno parte della membrana basale dei glomeruli, sono meglio determinati utilizzando l'ELISA in fase solida. È più sensibile e specifico del metodo di immunofluorescenza. Gli anticorpi alla membrana basale dei glomeruli sono rilevati nell'85% dei pazienti con sindrome di Goodpasture. Rilevazione di anticorpi alla membrana basale glomerulare, citoplasma dei neutrofili, così come anticorpi antinucleari e immunocomplessi è mostrato a tutti i pazienti con glomerulonefrite primaria rapidamente progressiva.

    E. Studio sui complementi

    1. Definizione. Il complemento è un sistema di proteine ​​del siero del latte termolabili (vedi Ch. 1, P. IV.G e Ch. 20, P. V), l'attivazione a cascata di cui innesca i complessi immunitari (percorso di attivazione classico) o la scissione diretta di C3 (percorso di attivazione alternativo). Quando il complemento è attivato, si formano i seguenti: 1) mediatori dell'infiammazione, 2) opsonine, che si legano alle cellule bersaglio e facilitano la loro fagocitosi, 3) un complesso che attacca la membrana che distrugge le cellule bersaglio.

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