Anticorpi IgG verso DNA denaturato (a singolo filamento) (DNA IgG anti-ss)

Cibo

Gli anticorpi anti DNA a singolo filamento (denaturato) (anti-ssDNA) sono autoanticorpi prodotti quando il sistema immunitario di una persona non è in grado di distinguere tra componenti cellulari propri ed estranei.

L'anti-ssDNA è prodotto dal lupus eritematoso sistemico (LES), dallo scleroderma e dall'artrite reumatoide, nonché da molte altre malattie non reumatiche. Gli anticorpi del DNA a singolo filamento (denaturato) sono molto aspecifici e possono essere rilevati in un'ampia varietà di patologie. Inoltre, gli anticorpi del DNA a doppio filamento possono reagire in modo incrociato con le immunoglobuline a filamento singolo, il che rende difficile interpretare il risultato dell'analisi.

Il livello di anticorpi del DNA a filamento singolo è determinato per valutare la gravità del lupus eritematoso sistemico, nonché a scopi di ricerca.

I sintomi di LES comprendono dolori articolari, rash, affaticamento, compromissione della funzionalità renale. Molto spesso, il lupus eritematoso sistemico è registrato nelle donne di età compresa tra 15 e 40 anni. La causa della malattia rimane poco chiara, ma si presume che ci sia una predisposizione genetica al LES.

Una delle complicanze più gravi di LES è la nefrite lupica, che è caratterizzata da una pronunciata infiammazione dei reni. La nefrite da lupus porta alla comparsa di proteine ​​nelle urine, un aumento della pressione sanguigna e insufficienza renale.

Questa analisi consente di identificare gli anticorpi contro il DNA a singolo filamento (denaturato). L'analisi aiuta a diagnosticare il lupus eritematoso sistemico.

metodo

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Analisi immunoenzimatica - ELISA.

Valori di riferimento - Norm
(Anticorpi contro DNA a singolo filamento (denaturato) (anti-ssDNA), quantitativo, sangue)

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Le informazioni relative ai valori di riferimento degli indicatori, nonché la composizione degli indicatori inclusi nell'analisi possono differire leggermente a seconda del laboratorio!

Anticorpi al DNA a singolo filamento (a-ssDNA)

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Gli anticorpi anti-DNA a filamento singolo sono un tipo di immunoglobuline antinucleari dirette contro molecole di DNA denaturate. L'anti-ssDNA è rilevato nel 70-80% dei pazienti con lupus eritematoso sistemico, ma la loro produzione non è specifica per questa malattia. L'analisi viene utilizzata per monitorare SLE, identificare la nefrite da lupus. La definizione degli anticorpi della classe IgM è utilizzata nella complessa diagnosi della sindrome del lupus. Il sangue viene prelevato da una vena, il livello di AT è determinato dall'ELISA. Il risultato normale è "negativo", l'indice è inferiore a 20 IU / ml. I termini del test sono 1 giorno.

Gli anticorpi anti-DNA a filamento singolo sono un tipo di immunoglobuline antinucleari dirette contro molecole di DNA denaturate. L'anti-ssDNA è rilevato nel 70-80% dei pazienti con lupus eritematoso sistemico, ma la loro produzione non è specifica per questa malattia. L'analisi viene utilizzata per monitorare SLE, identificare la nefrite da lupus. La definizione degli anticorpi della classe IgM è utilizzata nella complessa diagnosi della sindrome del lupus. Il sangue viene prelevato da una vena, il livello di AT è determinato dall'ELISA. Il risultato normale è "negativo", l'indice è inferiore a 20 IU / ml. I termini del test sono 1 giorno.

Gli anticorpi antinucleari sono prodotti dai linfociti B quando il sistema immunitario reagisce ai frammenti dei nuclei cellulari del proprio organismo come agenti esterni. Il sistema del complemento è attivato, si sviluppa un'infiammazione, si sviluppa un danno del tessuto autoimmune. Gli anticorpi al DNA a filamento singolo non sono specifici, sono prodotti in molte malattie, il più delle volte in forme maligne di LES, sclerodermia e artrite reumatoide. La bassa specificità dello studio ne limita l'uso per diagnosticare patologie autoimmuni, ma la sensibilità piuttosto elevata per SLE (fino all'80%) consente di utilizzarlo come strumento per il monitoraggio dei pazienti.

testimonianza

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La produzione di anti-ssDNA è la più caratteristica delle malattie reumatiche. Indicazioni per lo studio:

  • Lupus eritematoso sistemico. L'analisi è assegnata a persone con una diagnosi stabilita per valutare la gravità della malattia, determinare la natura del decorso, identificare il rischio di nefrite lupica. Titoli alti sono caratteristici della forma maligna, una probabilità significativa di danno renale.
  • Sindrome da lupus simile alla droga. Il test è indicato per i pazienti che assumono procainamide, idralazina, isoniazide, trimetadione, metildofu, fenotiazine. Viene eseguito allo scopo di formulare una diagnosi in concomitanza con lo studio degli anticorpi antinucleari.

Preparazione per l'analisi

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L'anti-ssDNA è determinato nel siero del sangue venoso. Il biomateriale viene raccolto al mattino. La preparazione per la procedura di consegna è di natura consultiva, include una serie di restrizioni:

  1. Per una settimana devi discutere con il tuo medico la necessità di cancellare il farmaco.
  2. Durante il giorno - smetti di bere alcolici, fai pesanti sforzi fisici. È necessario evitare l'influenza dei fattori di stress.
  3. Per 4-6 ore - astenersi dal mangiare. Consentito di bere acqua non gassata
  4. Per mezz'ora - smetti di fumare.
  5. Sessioni di terapia fisica, esami strumentali effettuati dopo la donazione di sangue.

Il sangue viene prelevato dalla vena cubitale, in provette sigillate viene consegnato al laboratorio. Il biomateriale viene centrifugato, i fattori di coagulazione vengono rimossi dal plasma separato. Il siero è sottoposto a saggio immunologico. L'intera procedura e preparazione dei dati richiede 1 giorno.

Valori normali

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Il risultato all'interno della norma è contrassegnato come negativo. Corrisponde alla concentrazione di anti-ssDNA da 0 a 20 ME / ml. I valori di riferimento non dipendono dall'età e dal sesso. Quando si interpretano, si consideri un numero di osservazioni:

  • Durante il monitoraggio del LES, un risultato negativo è un segno prognostico favorevole, indicando un basso rischio di sviluppare nefrite da lupus.
  • Bassi livelli / assenza di immunoglobuline specifiche non escludono la sindrome simile al lupus causata dai farmaci. La sensibilità del metodo è del 50%.

aumento dei tassi

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La bassa specificità del metodo si manifesta in una moltitudine di malattie in cui i livelli di AT sono elevati. Le ragioni della deviazione del valore totale dalla norma:

  • Lupus eritematoso sistemico. Nella fase attiva della malattia, un aumento del livello di globuline è determinato nel 78-80% dei pazienti, nella fase inattiva - nel 40-43%. I tassi più alti si osservano nella forma maligna con danno renale.
  • Sindrome da lupus della droga. La deviazione del valore del test è rilevata nel 50% dei pazienti.
  • Scleroderma sistemico. Durante l'esacerbazione, la frequenza di aumento della concentrazione di anti-ssDNA è del 50%, con remissione -30%.
  • Artrite reumatoide Le forme gravi sono accompagnate da un aumento del tasso di prova nel 35% dei casi.
  • Altre malattie reumatiche La concentrazione di globuline è aumentata sullo sfondo di lesioni diffuse del tessuto connettivo, vasculite, malattie delle articolazioni.
  • Infezione, leucemia. L'aumento si verifica sullo sfondo di epatite, mononucleosi infettiva, leucemia mieloide acuta, leucemia linfatica.
  • Caratteristiche individuali L'anti-ssDNA si trova nel 4% delle persone sane.

Trattamento di anomalie

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Il test degli anticorpi contro il DNA a filamento singolo è il più diffuso come metodo per il monitoraggio di SLE e per la rilevazione della nefrite da lupus. Il valore diagnostico dello studio è trascurabile. Reumatologo, dermatovenerologo, meno spesso - nefrologo, medico generico, interpreta il risultato e prescrive il trattamento.

Anticorpi al DNA nativo

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Quando la regolazione immunitaria nel corpo fallisce, si verificano guasti. La diagnosi precoce della condizione del corpo è importante, identificando i cambiamenti nel sangue, dovresti considerare una varietà di corpi estranei e le dinamiche della loro crescita. Sono diretti contro il DNA, il loro nucleo della molecola viene spostato verso la periferia e questi studi sono condotti per determinare la malattia.

Rilevazione molecolare

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Gli anticorpi al DNA nativo possono essere rilevati da vari metodi di prevalenza, è una grande percentuale. Rilevato in pazienti affetti da malattie infettive. A volte, a prima vista, trovati in persone sane, ma a carico dell'ereditarietà, spesso si sviluppano in giovane età. Il nucleo della cellula è interessato, si forma l'acido nucleico. Dopo aver rilevato i cambiamenti nella struttura della molecola di persone sane, dopo cinque anni, si sviluppa solitamente il lupus eritematoso. Ci sono cambiamenti sulla pelle e la funzionalità renale è compromessa. La rilevazione nel siero, associata all'attività del processo o può suggerire una prognosi medica. Un risultato positivo è confermato dai dati del sondaggio.
L'azione dei farmaci è un effetto collaterale del lupus farmaco-indotto. Le sindromi possono provocare farmaci, mentre assumono fenitoina, farmaci come chinidina, clorpromazina, idralazina. Annullando la droga, il livello di corpi estranei è ridotto. Per sei mesi, c'è una completa scomparsa dal siero.
In caso di malfunzionamenti sistemici del corpo, vengono prodotti anticorpi diretti al DNA nativo a doppio filamento. Allo stesso tempo, l'immunità si deteriora, il lavoro dei reni, il cervello soffre e i vasi sanguigni sono infiammati e danneggiati. La lesione vascolare è direttamente connessa con la presenza indispensabile di lesioni del tessuto connettivo, colpisce gli anziani, possibilmente con neuropatie sensoriali.

Ricerca molecolare

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Gli anticorpi al DNA nativo possono essere determinati: dopo la diagnosi di SLE, è necessario eseguire un test immunoenzimatico, in un giorno lavorativo. Lo studio è effettuato 2, 5 ore. La preparazione dell'analisi non è richiesta, è presa a stomaco vuoto, non sono richieste speciali restrizioni nella dieta. Dopo la venipuntura, il sangue viene aspirato in un tubo di vetro. L'analisi viene effettuata con siero di sangue venoso, che viene purificato da peptidi e proteine. Saggio immunoassorbente legato all'enzima condotto.
Se il siero contiene un elevato contenuto di inclusioni estranee, questo indica nefrite da lupus. Uno studio positivo è la base per la diagnosi di SLE. È considerato importante stabilire un'inclusione estranea, che indica una violazione del DNA. Per confermare un risultato positivo, vengono condotti ulteriori studi. I test di prescrizione seriali vengono effettuati per valutare il trattamento. Il medico del dermatologo, nefrologo, dermatovenerologo assegna lo studio.

Una varietà di diagnostica

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Il nucleosoma è formato dalla combinazione di filamenti di DNA con proteine ​​istoniche, fa parte del cromosoma. Il nucleo si trova in condizioni settiche, nei pazienti con cancro e SLE. Nell'apoptosi, l'endonucleosi rompe il DNA e i nucleosomi entrano nel flusso sanguigno.

Risultati positivi dell'analisi sono presenti nella maggior parte dei pazienti con lupus e pazienti con nefrite. Interagiscono con la proteina ciclina, che viene distrutta dopo la divisione cellulare. Nel 3% delle persone con lupus eritematoso si riscontrano cambiamenti. La specificità degli autoanticorpi contro il PCNA per SLE è del 99%. Nei pazienti con lupus si riscontrano una lesione del sistema nervoso centrale e trombocitopenia.
Gli autoanticorpi delle proteine ​​ribosomali sono altamente specifici per il LES. Si verifica in pazienti con epatite, con una violazione del sistema nervoso centrale, in pazienti con psicosi.

Gli anticorpi alle ribonucleoproteine ​​sono la sottofamiglia ANA, spesso si trovano in SLE.
Con un decorso più aggressivo della malattia della psicosi del lupus, le lesioni del sistema nervoso centrale rilevano la presenza di anticorpi anti-Sm. Prevalenza dal 5 al 40%.

Un terzo dei pazienti con segni di sclerosi progressiva o polimiosite, anticorpi contro U1-nRNP sono stati trovati. La malattia è chiamata sindrome di Sharpe.
Quando gli autoanticorpi SLE sono gravi sintomi di manifestazioni cutanee. Tali pazienti sono fotosensibili alle radiazioni ultraviolette. Per pazienti caratterizzati dalla durata della cura della malattia.
Si trovano anticorpi diffusi alla sclerodermia alla topoisomerasi. Le inclusioni anti-centromeriche non si manifestano nelle persone sane, quando tali anticorpi vengono rilevati, la sindrome di Raynaud si sviluppa.

I pazienti con anticorpi anti-PM-Scl richiedono una particolare attenzione al lavoro dei polmoni: fibrosi polmonare e alveolite fibrosa. Gli anticorpi antimitocondriali M2 sono presenti in pazienti con cirrosi biliare.
Nei pazienti con sclerodermia, malattie reumatiche, sono presenti anticorpi anti-Ro-52.
Dato il tipo di ricerca, la storia delle malattie si basa sui risultati ottenuti. I disturbi immunitari colpiscono la pelle, il sistema circolatorio, il tessuto connettivo, i reni, le articolazioni e altri organi. Frazioni di lupus anticoagulante possono innescare il progredire della sindrome emorragica. La presenza di corpi estranei nel sangue varia con il decorso della malattia. Un numero elevato indica una malattia progressiva. Ma una tale sequenza non sempre si verifica. Livelli elevati sono caratteristici delle infezioni da lupus di droga, epatite B e C.

Il risultato è attivamente influenzato dalla terapia efficace, dalla perdita di controllo nel corso del trattamento. È importante sottolineare che il rilevamento di un risultato negativo non garantisce la diagnosi di SLE. Il rilevamento di microparticelle estranee, senza cambiamenti clinici, non è una base per fare una diagnosi. Devi essere attento allo stato di salute, condurre un esame immunologico. Ci sono molti disturbi del corpo che non si manifestano, a volte si scopre che è troppo tardi per guarirli. Per mantenere una mente e un corpo sani, i medici raccomandano visite mediche ogni anno.

No. 126, anticorpi di classe IgG a DNA (nativo) a doppia elica (anticorpi IgG anti-doppio filamento (DNA), anti-dsDNA IgG)

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L'interpretazione dei risultati della ricerca contiene informazioni per il medico curante e non è una diagnosi. Le informazioni in questa sezione non possono essere utilizzate per l'autodiagnosi e l'auto-trattamento. Una diagnosi accurata viene fatta dal medico, utilizzando sia i risultati di questo esame sia le informazioni necessarie da altre fonti: anamnesi, risultati di altri esami, ecc.

* Il periodo specificato non include il giorno di assunzione del biomateriale

Immunochemiluminescent (CLIA), quantitativo

In questa sezione, puoi scoprire quanto costa completare questo studio nella tua città, vedere la descrizione del test e la tabella di interpretazione dei risultati. Scegliendo dove passare l'analisi degli anticorpi di classe IgG a DNA a doppia elica (IgG anti-dsDNA, anticorpi anti-DNA a DNA a doppia elica (nativi), anti-dsDNA IgG) "a Mosca e in altre città russe, non dimenticarlo Il prezzo dell'analisi, il costo della procedura sui biomateriali, i metodi e i tempi della ricerca negli uffici medici regionali possono variare.

Anticorpi contro DNA a filamento singolo (anti-ssDNA), IgG

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Uno studio per rilevare gli anticorpi nel sangue del DNA a singolo filamento (denaturato), che può essere utilizzato per diagnosticare e valutare l'attività dello scleroderma focale.

Sinonimi russi

Anticorpi contro DNA a filamento singolo, immunoglobuline di classe G;

Anticorpi al DNA denaturato;

Sinonimi inglesi

Anticorpo allo ss-DNA;

Anticorpo di DNA a filamento singolo denaturato;

Anticorpo a DNA a filamento singolo.

Metodo di ricerca

Saggio immunoassorbente legato all'enzima (ELISA).

Unità di misura

Unità / ml (unità per millilitro).

Quale biomateriale può essere utilizzato per la ricerca?

Come prepararsi per lo studio?

  • Non fumare per 30 minuti prima dello studio.

Informazioni generali sullo studio

Gli anticorpi al DNA a filamento singolo (anti-ssDNA) appartengono al gruppo di anticorpi antinucleari, cioè agli autoanticorpi diretti contro i componenti dei propri nuclei. Gli antigeni per l'anti-ssDNA sono basi azotate, nucleotidi e nucleosidi nella composizione del DNA a filamento singolo. Nel sangue della maggior parte delle persone è possibile rilevare l'anti-ssDNA, appartenente alla classe delle immunoglobuline IgM. La classe IgM anti-ssDNA non ha un valore diagnostico indipendente. Al contrario, l'anti-ssDNA della classe IgG è caratteristico di molte malattie sistemiche del tessuto connettivo, come il lupus eritematoso sistemico, l'artrite reumatoide, la polimiosite / dermatomiosite, ecc. Molto spesso, l'anti-ssDNA è osservato nei pazienti con scleroderma focale. Questi anticorpi dovrebbero essere distinti dagli anticorpi al DNA nativo a doppio filamento (anti-dsDNA), che lega coppie di basi, nucleotidi e nucleosidi come parte del DNA a doppio filamento.

L'anti-ssDNA viene rilevato nel 50% dei pazienti con varie forme di sclerodermia focale. Lo scleroderma focale è caratterizzato da fibrosi limitata della cute e tessuto adiposo sottocutaneo, ma a volte può coinvolgere tessuto muscolare e osseo. A differenza della sclerodermia sistemica, la prognosi della malattia è favorevole, poiché lo scleroderma focale non colpisce mai gli organi interni e il fenomeno di Raynaud non viene osservato. Per la diagnosi differenziale di sclerodermia focale e sistemica, è possibile indagare la concentrazione di anti-ssDNA. Questi anticorpi sono più caratteristici dello scleroderma localizzato e focale. Un segno specifico di sclerosi sistemica è la presenza di anti-Scl-70. È importante notare che il risultato negativo dello studio anti-ssDNA non elimina completamente la diagnosi di sclerodermia focale.

Lo studio dell'anti-ssDNA ha il maggior valore diagnostico nella dermatologia pediatrica. La forma più comune di sclerodermia focale nei bambini è lo scleroderma lineare (en coup de sabre). In questo caso, la fibrosi si presenta in modo lineare lungo la lunghezza dell'arto, nella regione frontale o lungo il fascio neurovascolare. Con lo sviluppo di atrofia profonda con il coinvolgimento delle strutture muscolari, la malattia diventa disabilitante. È stato dimostrato che nei pazienti con una forma lineare di sclerodermia, un'alta concentrazione di anti-ssDNA è associata al coinvolgimento del tessuto muscolare sottostante, pertanto lo studio della concentrazione di questi autoanticorpi può essere utilizzato per valutare la prognosi della malattia.

Il livello di anti-ssDNA riflette l'attività dello scleroderma focale. La più alta concentrazione di questi autoanticorpi si trova con una forma generalizzata di sclerodermia focale. Quando la malattia raggiunge la remissione, la concentrazione anticorpale diminuisce e il risultato dell'analisi può diventare negativo. Per questo motivo, uno studio di concentrazione anti-ssDNA può essere usato per controllare il trattamento di una malattia.

Va notato che la presenza di anti-ssDNA non è un segno strettamente specifico di sclerodermia focale. Inoltre, questi autoanticorpi possono essere trovati nel sangue di persone sane. Per questo motivo, un risultato positivo del test non sempre indica la presenza di una malattia. L'interpretazione dell'analisi viene effettuata tenendo conto di ulteriori dati clinici, di laboratorio e strumentali.

A cosa serve la ricerca?

  • Per la diagnosi differenziale di sclerodermia focale e sistemica;
  • valutare l'attività e la prognosi dello scleroderma focale.

Quando è programmato uno studio?

  • In presenza di sintomi di sclerodermia focale: lesioni limitate sotto forma di densi al tatto di placche o aree di atrofia della pelle, accompagnate dalla perdita di tutti i tipi di sensibilità nel fuoco.

Cosa significano i risultati?

Valori di riferimento: 0 - 20 U / ml.

In questo studio, viene determinata la concentrazione di anticorpi. Se è inferiore a 20 U / ml, il risultato è "normale", se è più, il risultato è "aumento del contenuto".

  • scleroderma focale;
  • lupus eritematoso sistemico;
  • lupus della droga;
  • artrite reumatoide;
  • dermatomiosite / polimiosite;
  • La sindrome di Sjogren;
  • askulity;
  • colite ulcerosa e malattia di Crohn;
  • malattia mista del tessuto connettivo.
  • la norma;
  • remissione della malattia;
  • campionamento biomateriale sbagliato per la ricerca.

Cosa può influenzare il risultato?

  • La terapia efficace e il raggiungimento della remissione della malattia sono associati a un basso titolo di anti-ssDNA.

Note importanti

  • Un risultato negativo dello studio non consente di escludere la diagnosi di "sclerodermia focale";
  • l'anti-ssDNA può essere osservato nelle persone sane;
  • l'interpretazione del risultato dello studio dovrebbe essere effettuata tenendo conto di ulteriori dati clinici e di laboratorio.

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Chi fa lo studio?

Dermatovenerologo, reumatologo, pediatra, medico di famiglia.

letteratura

  • Hahn bh. Anticorpi al DNA. N Engl J Med. 1998, 7 maggio; 338 (19): 1359-68.
  • Takehara K, Sato S. Lo scleroderma localizzato è una malattia autoimmune. Reumatologia (Oxford). 2005 Mar; 44 (3): 274-9.
  • Kavanaugh A, Tomar R, Reveille J, Solomon DH, Homburger HA. Automatici per antigeni antigeni tonucleari. American College of Pathologists. Arch Pathol Lab Med. 2000 gennaio; 124 (1): 71-81.
  • Mutasim DF, Adams BB. Una guida pratica per la valutazione sierologica delle malattie del tessuto connettivo autoimmune. J Am Acad Dermatol. 2000 Feb; 42 (2 Pt 1): 159-74; quiz 174-6.

Anticorpi al DNA denaturato

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La disgregazione dell'attività funzionale dei linfociti T e B si riflette nello sviluppo di varie forme di immunosoppressione.

Il lupus eritematoso sistemico (SLE) e l'artrite reumatoide (RA) sono malattie autoimmuni croniche (AID) con eziologia poco chiara e un ampio quadro di immunopatogenesi, riduzione della qualità e della longevità della popolazione, quindi, sono tra i problemi biomedici e sociali importanti dei tempi moderni [4; 3].

Per i pazienti con LES, un aumento del livello di IgG-AT in nDNA, che hanno attività di idrolisi del DNA, è caratteristico [4; 5] e, probabilmente, sono partecipanti al processo patologico. Ma oggi non c'è consenso tra i ricercatori sul contributo di AT all'NDNA nello sviluppo e nel corso dell'AIS.

In RA, si osserva anche un aumento del livello di anticorpi di idrolisi del DNA, ma i segni clinici differiscono da LES [3; 7]. Di conseguenza, il decorso del processo patologico può essere determinato non solo dal livello di anticorpi del DNA, ma anche dalle loro proprietà, che differiscono nei diversi AIID.

Recenti studi hanno dimostrato che alcuni anticorpi del DNA penetrano nelle cellule e influenzano i processi intracellulari [9].

Si può ipotizzare che l'IgG-AT all'nDNA, interagendo con il DNA cellulare e modificando la struttura della cromatina, porti a un'apoptosi alterata delle cellule immunocompetenti, risultando in un aumento del materiale apoptotico e del tempo della sua circolazione nel sangue, che è accompagnato da SLE e aggrava il processo autoimmune.

Lo scopo del lavoro era quello di studiare la genotossicità degli anticorpi di classe IgG al DNA nativo nella coltura primaria dei linfociti di individui sani.

Materiali e metodi di ricerca

Isolamento di IgG-AT a NDNA dal siero umano

Tutte le fasi di purificazione dell'isolamento e purificazione di IgG-AT in nDNA dai sieri di donatori e pazienti con SLE e RA sono state eseguite secondo il metodo precedentemente sviluppato [4]. Abbiamo usato AT per il DNA di siero di sangue femminile - 20 sieri di donatori sani, 7 sieri di pazienti affetti da SLE e 20 sieri di pazienti affetti da AR durante il periodo di esacerbazione della malattia ottenuti nelle istituzioni mediche di Kazan. La diagnosi di SLE e RA è stata effettuata da reumatologi qualificati del GOU DPO "Kazan State Medical Academy dell'Agenzia federale per la salute e lo sviluppo sociale".

La selezione dei linfociti dal sangue intero di individui sani è stata effettuata secondo il metodo standard su ficoll-verografin - densità 1.077 mg / ml [10].

Coltivazione dei linfociti in presenza di IgG-AT in nDNA

Alle cellule (2 × 10 4 cellule / pozzetto) diluite con RPMI-1640 a pH medio completo 7.4 (Gibco, Scozia) contenente siero bovino fetale inattivato al 10%, 2 mM di glutammina ("Serva", Germania), 100 U / ml di penicillina (Russia), 100 μg / ml di streptomicina (Russia), subfrazioni IgG-AT purificate sono state aggiunte a nDNA ad una concentrazione finale di 1 μg / ml. Ogni esperimento è stato ripetuto tre volte. Le cellule sono state incubate a 37 ºС, 0,5% CON2 entro 72 ore.

Il numero totale e il numero di linfociti vitali dopo l'isolamento dal sangue intero e l'incubazione con subfrazioni di IgG-AT a nDNA è stato determinato mediante il metodo di esclusione del tripan blu.

Il livello di danno al DNA nucleare delle cellule dopo la coltivazione con subfrazioni di IgG-AT a nDNA è stato determinato mediante spettrofotometria a fluorescenza cambiando l'intensità di fluorescenza del complesso di cromatina EB-DNA dei linfociti [2].

Determinazione del livello di danno al DNA nucleare mediante il metodo di elettroforesi su gel di singole cellule - "DNA di comete"

Una soluzione all'1% di agarosio a basso punto di fusione (Fermentas, Canada) è stata utilizzata in PBS. 60 μl di gel di agarosio con cellule (2 • 10 4 - 5 • 10 4) sono stati applicati su un vetrino rivestito con polilisina (ApexLab, Russia), distribuiti uniformemente e lasciati per 30 minuti a +20 ° C. Lisi cellulare (10 mM Tris-HCl pH 10, 2,5 M NaCl, 100 mM EDTA-Na2, 1% Triton X-100, 5% DMSO, +4 ° C) è stato effettuato per 1 ora. Gli occhiali sono stati quindi trasferiti al tampone di elettroforesi (300 mM NaOH, 1 mM EDTA-Na2, pH> 13, +4 ° C) e lasciato per 20 minuti. L'elettroforesi è stata effettuata per 20 minuti a 1 V / cm e 300 mA. Alla fine, i preparati sono stati trasferiti alla soluzione di fissazione (alcool etilico al 70%) per 15 minuti, quindi essiccati a +20 ° C (1-2 ore). Le cellule incubate per 5 minuti a -20 ° C in presenza di 100 μM N sono state utilizzate come controllo positivo per la visualizzazione della degradazione del DNA.2oh2. Le preparazioni sono state colorate con arancio di acridina (20 μg / ml) per 30 minuti e analizzate su un microscopio a fluorescenza (AxioScope A1, ararl Zeiss, Germania) con filtri appropriati (filtro di eccitazione 490 nm, specchio dicroico 510, filtro cut-off 530 nm), ingrandimento 40x.

Elaborazione di dati statistici

Dai dati ottenuti, le variazioni di vitalità e intensità di fluorescenza delle cellule di EB-DNA sono state calcolate mediana, 97,5 e 2,5 percentili, utilizzando il pacchetto standard Excel Office 2003 e il criterio Dunnet è stato utilizzato anche [1].

RISULTATI DELLA RICERCA E LORO DISCUSSIONE

Un aumento del livello di anticorpi anti-idrolisi del DNA è osservato in SLE e RA, ma il quadro clinico della malattia è diverso [4; 7]. Presumibilmente, le IgG-AT per l'nDNA sono induttori e partecipanti al processo infiammatorio in AIZ, ma ciò che determina il loro potenziale patogenetico e il modo in cui viene realizzato nel corpo non è completamente compreso.

Pertanto, per una comprensione più approfondita del ruolo degli anticorpi verso l'nDNA nell'induzione e nel decorso della sindrome autoimmune, è stata valutata la dipendenza della genotossicità di IgG-AT dall'nDNA sulle loro proprietà fisico-chimiche e immuno-chimiche.

Da ciascun siero, 4 sottofrazioni di immunocomplessi di IgG-AT a nDNA, diversi di carica (frazioni I, caratterizzate da carica generale positiva e frazione II con carica negativa totale) e affinità con nDNA - subfrazione a, eluiti da nDNA-cellulosa sono stati ottenuti il tampone contenente NaCl 1M e le sottofrazioni b, eluite dall'assorbente con tampone Gly-HCl con pH 2.3, che ci consente di formulare un'ipotesi sulla loro maggiore affinità per l'antigene.

È stato dimostrato che in presenza di IgG-AT caricata positivamente sul nDNA del donatore, il numero totale e il numero di linfociti vitali è ridotto rispetto al controllo (PBS) (Fig. 1). Le IgG-AT del nDNA dei pazienti con SLE allo stadio di esacerbazione della malattia hanno un effetto simile all'AT dei donatori sui linfociti di individui sani, ma il loro effetto è più pronunciato, probabilmente a causa della loro elevata attività di idrolisi del DNA.

La mancanza di segni clinici di malattia tra donatori con un effetto simile sulle cellule IgG-AT a nDNA di donatori e pazienti con SLE allo stadio di esacerbazione della malattia è spiegata dal fatto che il livello di IgG-AT di nDNA nel sangue di persone sane è significativamente inferiore rispetto ai pazienti affetti da LES. Inoltre, la maggior parte delle IgG-AT per nDNA nel sangue di individui sani si trova in complessi immunitari con anticorpi anti-idiotipici [4] o biopolimeri caricati negativamente con una conformazione simile al DNA.

Nel processo di isolamento di IgG-AT a nDNA dai sieri, si verifica la distruzione dei complessi immunitari di AT-DNA con la formazione di AT libero verso l'nDNA, e negli esperimenti su linfociti abbiamo usato le stesse concentrazioni di tutte le AT testate, ottenendo così l'opportunità di osservare un potenziale effetto negativo sulle cellule in vitro. donatori.

Fig. 1. Variazioni del numero totale e del numero di linfociti vitali di individui sani dopo 72 ore di incubazione a 37 ° C in presenza di subfrazioni IgG-AT a nDNA:

Ia - IgG-AT a bassa affinità con carica positiva per nDNA;

IIa - IgG-AT a bassa affinità con carica negativa per nDNA;

IB - IgG-AT ad alta affinità con carica positiva per nDNA;

IIb - IgG-AT ad alta affinità con carica negativa per nDNA.

Probabilmente, l'anormale SCV-AT dell'nDNA può verificarsi da AT naturale, che svolge funzioni protettive nel corpo, ma rimane aperta la questione dei motivi di questa commutazione anormale.

È stato dimostrato per la prima volta che lo spettro delle sottofrazioni citotossiche di IgG-AT e nDNA nei sieri dei pazienti con RA differisce dalla norma e dal LES. Insieme agli anticorpi a bassa affinità caricati positivamente sul DNA, caratteristici di donatori e pazienti con SLE, le sottofrazioni ad alta affinità positive e negative di IgG-AT e nDNA nei pazienti con artrite reumatoide determinano una marcata diminuzione della proliferazione e del numero di linfociti vitali di individui sani in vitro.

I cambiamenti nella condensazione della cromatina dei linfociti dopo l'esposizione delle sottofrazioni IgG-AT all'nDNA sono stati esaminati mediante spettrofotometria a fluorescenza. La formazione di lacune nel DNA porta alla decompattazione della cromatina, ad un aumento dei siti di legame dell'EB con l'acido nucleico e ad un aumento della fluorescenza del complesso EB-DNA [2].

Inoltre, la genotossicità di IgG-AT per nDNA è stata valutata mediante il metodo del DNA della cometa. Se ci sono lacune nel DNA, l'organizzazione strutturale della cromatina è disturbata e il supercoiling è perso, il che porta al rilassamento delle molecole. Nel campo elettrico, i loop rilassati ei frammenti di DNA sono tesi verso l'anodo, il che conferisce agli oggetti osservati l'aspetto di "comete". In base alla lunghezza e alla struttura della coda cometaria, si può giudicare il grado di degradazione del DNA delle cellule.

Un aumento dell'intensità della fluorescenza del complesso EB-DNA in campioni incubati con IgG-AT caricati positivamente ai donatori di nDNA (Ia, Ib) indica un cambiamento nella struttura del DNA delle cellule di cromatina - la rimozione di superavvolgimento e l'eventuale formazione di spazi vuoti (Tabella 1). La formazione di "code di comete" è stata rilevata su micrografie tipiche di oggetti dopo incubazione di cellule con IgG-AT caricate positivamente su nDNA (Figura 2B), che non è osservata nel controllo PBS negativo (Figura 2A) ed è un riflesso del genotipo di AT a DNA. Probabilmente, alcuni AT di DNA che legano i donatori, penetrando nelle cellule, possono raggiungere il nucleo, legarsi al DNA e modificarne la conformazione. Ad esempio, è stato dimostrato che AT nel sito di legame del DNA aumenta significativamente la sua distruzione da parte dei radicali idrossili [8]. Probabilmente, a nDNA promuovere la distruzione ossidativa di nDNA, cambiando la sua struttura, rendendo disponibili siti di restrizione di radicali idrossili.

Tabella 1 - Variazioni del livello di fluorescenza della cromatina EB-DNA dei linfociti dopo 72 ore di incubazione a 37 ° C con sottofrazioni di IgG-AT a nDNA

sottofrazione

IgG-AT per nDNA

Intensità di fluorescenza del complesso di EB-DNA, unità / cellula

Anticorpi al DNA denaturato

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Il problema della sclerosi multipla (SM) è causato da un aumento annuale del numero di persone che soffrono di questa malattia. Lo studio delle cause, dello sviluppo e del trattamento di questa malattia estremamente grave del sistema nervoso centrale è rilevante per uno dei principali posti nella pratica neurologica [5], essendo una priorità nella medicina moderna. La sclerosi multipla è una malattia demielinizzante cronica clinicamente eterogenea del sistema nervoso di eziologia sconosciuta. Quando la MS aumenta la concentrazione di IgG, che contiene anticorpi specifici (AT) contro vari componenti della mielina; anticorpi antinucleari identificati al DNA, anticorpi ad altre strutture e tessuti del corpo [3]. Il significato patogenetico e clinico di questi anticorpi non è ben compreso. Negli ultimi anni, gli anticorpi al DNA nativo e denaturato hanno dimostrato di svolgere un ruolo nello sviluppo della sclerosi multipla. La frequenza di insorgenza di questi anticorpi è significativamente più alta nei pazienti con un decorso sfavorevole della malattia [2] e si verifica anche durante l'osservazione dinamica nella fase attiva della malattia [1], che indica una stretta relazione tra la produzione di anticorpi e gli stadi principali della malattia. I livelli di anticorpi antinucleari possono variare in modo significativo, non solo in base alla singola immunoreattività del paziente, alla natura e allo stadio della malattia, ma anche come una risposta autoimmune al DNA sia nativo che denaturato [1].

Con la SM, c'è un approfondimento dei processi distruttivi, che può manifestarsi nel potenziamento dell'intossicazione endogena, caratterizzato da uno spettro di molecole di peso medio. Si tratta di sostanze proteiniche con un peso molecolare di 300-5000 dalton (Da), in relazione alle quali vengono spesso chiamate molecole di medio peso (MSM) o peptidi a media molecola (SMP) [6]. I MSM sono diventati noti come importanti fattori universali di intossicazione. La determinazione di MSM di diversa natura nel siero in pazienti psichiatrici e neurologici è informativa [7].

I processi distruttivi alla base della sindrome non specifica dell'intossicazione endogena, di regola, sono associati all'attivazione dello stress ossidativo e sono accompagnati da una struttura e una funzione alterate delle membrane [14]. L'accumulo di MSM non è solo un marker di endotossicità, ma anche un fattore che aggrava il corso del processo patologico - acquisendo il ruolo di tossine secondarie, provocando una rottura della barriera emato-encefalica, la microvascolarizzazione, inibendo i processi di ossidazione mitocondriale, interrompendo il trasporto dell'amminoacido [6]. Il disaccoppiamento quasi completo di ossidazione e fosforilazione, la violazione dei meccanismi di regolazione dell'intensità della respirazione da parte di adenil nucleotidi sotto l'influenza di MSM sono stati rivelati. Uno dei possibili meccanismi dell'azione neurotossica di MSM è l'inibizione del meccanismo di trasporto attivo degli ioni sodio e potassio attraverso la membrana degli elementi cellulari dei tessuti del SNC.

Lo scopo di questo studio era di studiare le caratteristiche dello spettro di molecole di massa media e la frequenza di anticorpi al DNA nativo e denaturato in pazienti con vari tipi di sclerosi multipla.

Materiali e metodi di ricerca

Utilizzando i criteri diagnostici McDonald [12] ha condotto un esame clinico e biologico completo di 65 pazienti con una diagnosi verificata di sclerosi multipla sottoposti a terapia presso la clinica neurologica dell'Università di Stato della Siberia (Tomsk) o in regime ambulatoriale. Come gruppo di controllo per gli studi di laboratorio, sono stati esaminati 27 individui praticamente sani, corrispondenti al sesso e all'età dei pazienti studiati. Lo studio è stato condotto in conformità con gli standard bioetici secondo il protocollo approvato dal comitato bioetico locale. L'età media dei pazienti al momento dell'indagine era di 35,7 anni (da 16 a 58 anni), l'età media di insorgenza della malattia era 29,50 (12-47) anni e la durata della malattia era 10,35 ± 7,19 anni (da 1 a 19 anni ). Le donne costituivano il 61,12% di tutti i pazienti (39 persone), gli uomini - il 38,88% (23 persone).

La gravità del deficit neurologico è stata valutata in base alle scale funzionali di Kurtzke [11] con la determinazione della somma dei punti di deficit neurologico (FS) e del grado di disabilità (EDSS). Il tasso di progressione è stato definito come il rapporto tra il punteggio EDSS e la durata della malattia, mentre nei pazienti con SM aveva un valore di 0,79 ± 0,01 (0,25-1,86) (p = 0,002).

39 (58,06%) pazienti sono stati diagnosticati con un tipo di malattia remittente (RRS), 19 (30,62%) - progressivo secondario (CDPR), 7 (11,29%) - progressivo primario (CPS).

Il siero del sangue periferico del paziente è stato usato come materiale per gli studi di laboratorio. I parametri di intossicazione endogena sono stati stimati dallo spettro delle molecole di peso medio nel siero mediante il metodo di screening [8] nella nostra modifica [7]. Il principio del metodo si basa sul rilascio di siero di sangue da peptidi e proteine ​​ad alto peso molecolare contenuti in esso utilizzando acido tricloroacetico e determinazione quantitativa del livello di SMP ottenuto dopo centrifugazione del liquido supernatante per assorbimento in un flusso di luce monocromatico alla lunghezza d'onda di 280, 254, 230 nm. I risultati sono stati espressi in unità di assorbimento ottico. Ad una lunghezza d'onda di 280 nm (unità A280) ha rilevato la frazione MSM280, contenenti amminoacidi aromatici; a 254 nm (unità A254) - frazione MSM254, non contenente aminoacidi - prodotti di degradazione incompleta delle proteine, con effetti tossici; a 230 nm (unità A230) - frazione MSM230, legato ai residui di acido nucleico.

Per la determinazione immunoenzima degli anticorpi IgG a DNA a filamento singolo ea doppio filamento nel siero, sono stati utilizzati i sistemi di test "Vekto-ssDNA-IgG" e "Vekto-dsDNA-IgG" fabbricati da JSC "Vector-Best" (Russia). Il contenuto relativo degli anticorpi anti-DNA nei campioni di prova è stato espresso in unità di assorbimento ottico a 450 nm (unità A450).

L'analisi statistica e l'elaborazione dei dati sono state eseguite utilizzando Statistica, versione 6.0 per il pacchetto di applicazioni Windows (StatSoft. Inc., 2001). Il significato delle differenze è stato determinato dal test t di Student e utilizzando il test non parametrico di Mann-Whitney per campioni indipendenti. Le differenze sono state considerate statisticamente significative al livello di significatività raggiunto p 0,05

Anticorpi contro DNA denaturato (lupus eritematoso sistemico)

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Metodo di ricerca: IHL.

Biomateriale: sangue (siero).

Gli anticorpi contro il DNA denaturato (lupus eritematoso sistemico) sono un marker del lupus eritematoso sistemico.

Gli anticorpi al DNA sono suddivisi in due tipi principali: anticorpi che reagiscono con DNA (nativo) a doppio filamento (dsDNA) e anticorpi che reagiscono con DNA a singolo filamento (denaturato) (ssDNA). Gli AT al dsDNA sono più specifici per la diagnosi di lupus eritematoso sistemico (LES) rispetto agli AT allo ssDNA, che sono presenti nei sieri di pazienti con altre malattie reumatiche e che non hanno un valore diagnostico significativo.

Gli anticorpi anti-DNA denaturato sono coinvolti nella patogenesi del danno renale nella nefrite da lupus, quindi il test è ampiamente utilizzato per diagnosticare il lupus eritematoso discoide.

È richiesto un addestramento speciale. Si raccomanda di prendere il sangue non prima di 4 ore dopo l'ultimo pasto.

Anticorpi allo screening del DNA a doppio filamento (anti-dsDNA)

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Anticorpi contro il DNA a doppio filamento - autoanticorpi diretti contro il proprio DNA a doppio filamento, osservati con lupus eritematoso sistemico. Ricercato per diagnosticare, valutare l'attività e controllare il trattamento di questa malattia.

Sinonimi russi

Anticorpi al DNA a doppia elica, anticorpi al DNA nativo, anti-DNA.

Sinonimi inglesi

Anticorpo a ds-DNA, anticorpo nativo a DNA a doppio filamento, anti-DNA, anticorpo a doppio filamento di DNA.

Metodo di ricerca

Saggio immunoassorbente legato all'enzima (ELISA).

Unità di misura

IU / ml (unità internazionale per millilitro).

Quale biomateriale può essere utilizzato per la ricerca?

Come prepararsi per lo studio?

Non fumare per 30 minuti prima di donare il sangue.

Informazioni generali sullo studio

Gli anticorpi anti-DNA a doppio filamento (anti-dsDNA) appartengono al gruppo degli anticorpi antinucleari, cioè agli autoanticorpi diretti dal corpo contro i componenti dei propri nuclei. Mentre gli anticorpi antinucleo sono caratteristici di molte malattie del gruppo di malattie del tessuto connettivo diffuse, l'anti-dsDNA è considerato specifico per il lupus eritematoso sistemico (SLE). Rilevazione di anti-dsDNA è uno dei criteri per fare una diagnosi di "SLE".

L'anti-dsDNA può essere rilevato mediante saggio immunoenzimatico. L'alta sensibilità (circa il 100%) di questo test è necessaria quando si esaminano campioni con una bassa quantità di anticorpi. Considerando che diversi tipi di autoanticorpi possono essere presenti contemporaneamente nel siero di pazienti con malattie sistemiche del tessuto connettivo, e anche il fatto che spesso la diagnosi differenziale di queste malattie si basa sull'identificazione di un particolare tipo di anticorpo, è estremamente importante tener conto dell'elevata specificità nella scelta di un test di laboratorio. La specificità del dosaggio anti-dsDNA è del 99,2%, il che rende questo studio indispensabile nella diagnosi differenziale di SLE.

L'anti-dsDNA è rilevato nel 50-70% dei pazienti al momento della diagnosi "SLE". Si ritiene che i complessi immuni costituiti da DNA a doppio filamento e anticorpi specifici (immunoglobuline IgG e IgM) siano coinvolti nello sviluppo delle microvascoliti e causino la sintomatologia caratteristica del LES sotto forma di danni alla pelle, ai reni, alle articolazioni e a molti altri organi. L'anti-dsDNA è così tipico di SLE che consente di diagnosticare questa malattia anche con un test di screening negativo per gli anticorpi antinucleari. Tuttavia, va notato che l'assenza di anti-dsDNA non esclude la presenza di SLE.

Il rilevamento di anti-dsDNA in un paziente senza segni clinici e altri criteri di questa malattia non è interpretato a favore della diagnosi di "SLE", ma tali pazienti sono a rischio di sviluppare SLE in futuro e devono essere monitorati da un reumatologo, poiché la comparsa di anti-dsDNA può precedere l'insorgenza malattie per diversi anni.

La concentrazione di anti-dsDNA varia a seconda delle caratteristiche del decorso della malattia. Di norma, un indice alto indica un'attività elevata di SLE, mentre uno basso indica una remissione della malattia. Pertanto, la misurazione della concentrazione di anti-dsDNA viene utilizzata per monitorare il trattamento e la prognosi della malattia. L'aumento della concentrazione indica un controllo insufficiente della malattia, la sua progressione, così come la possibilità di lupus nefrite. Al contrario, una concentrazione costantemente bassa di anticorpi è un buon segno prognostico. Va notato che questa dipendenza non è osservata in tutti i casi. Il livello di anti-dsDNA viene misurato regolarmente, ogni 3-6 mesi, in caso di lieve gravità di SLE ea intervalli più brevi quando non vi è alcun controllo sulla malattia, con la scelta della terapia, durante la gravidanza o il periodo postparto.

La sindrome clinica speciale è il lupus della droga. Nonostante la significativa somiglianza del quadro clinico di questa condizione con LES, il lupus della droga presenta una serie di differenze: innescato dall'assunzione di farmaci (procainamide, idralazina, propiltiouracile, clorpromazina, litio, ecc.) E scompare completamente dopo la loro cancellazione, raramente coinvolge gli organi interni e quindi ha più prognosi favorevole, e meno spesso combinata con la presenza di anti-dsDNA. Pertanto, quando un risultato negativo dell'analisi anti-dsDNA in un paziente con segni clinici di lupus autoimmune e la presenza di un fattore antinucleare, il lupus deve essere escluso.

Nonostante il fatto che un alto anti-dsDNA sia caratteristico del SLE, la loro bassa concentrazione si riscontra anche nel sangue dei pazienti e con alcune altre malattie del tessuto connettivo diffuse (sindrome di Sjogren, una malattia mista del tessuto connettivo). Inoltre, il test può essere positivo nei pazienti con epatite B e C cronica, cirrosi biliare primitiva e mononucleosi infettiva.

Lo spettro degli autoanticorpi in SLE include anche altri anticorpi antinucleari (anti-Sm, RNP, SS-A, SS-B), anti-plasma e anti-fosfolipidi. Trovarli nel siero di un paziente con segni clinici di SLE insieme a anti-dsDNA aiuta anche a fare una diagnosi. Inoltre, la determinazione della concentrazione di anti-dsDNA deve essere integrata con alcune analisi cliniche generali.

A cosa serve la ricerca?

  • Per la diagnosi, la valutazione dell'attività e il monitoraggio del trattamento del lupus eritematoso sistemico;
  • per diagnosi differenziale di malattie diffuse del tessuto connettivo.

Quando è programmato uno studio?

  • Con sintomi di lupus eritematoso sistemico: febbre, lesioni cutanee (eritema farfalla o eruzioni cutanee rosse sul viso, avambracci, torace), artralgia / artrite, polmonite, pericardite, epilessia, danno renale;
  • quando rileva anticorpi antinucleari nel siero, specialmente se si ottiene un tipo di nucleo immunofluorescente omogeneo o granulare (maculato);
  • regolarmente, ogni 3-6 mesi, con una lieve gravità di SLE o più spesso in assenza di controllo della malattia.

Cosa significano i risultati?

Concentrazione: 0 - 25 IU / ml.

  • lupus eritematoso sistemico;
  • terapia efficace, remissione del lupus eritematoso sistemico;
  • La sindrome di Sjogren;
  • malattia mista del tessuto connettivo;
  • epatite cronica B e C;
  • cirrosi biliare primitiva;
  • mononucleosi infettiva.
  • mancanza di lupus eritematoso sistemico;
  • lupus eritematoso.

Cosa può influenzare il risultato?

  • La terapia efficace e il raggiungimento della remissione della malattia sono associati a bassi livelli di anti-dsDNA;
  • mancanza di controllo della malattia, esacerbazione della malattia, nefrite da lupus sono associati ad alti livelli di anti-dsDNA.

Note importanti

  • La mancanza di anti-dsDNA non preclude la diagnosi di "SLE".
  • La rilevazione di anti-dsDNA in un paziente senza segni clinici e altri criteri di questa malattia non viene interpretata a favore della diagnosi di "SLE".
  • L'anti-dsDNA è un marker specifico di SLE, ma può essere osservato in alcune altre malattie (epatite cronica B e C, malattie autoimmuni).

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Chi fa lo studio?

Reumatologo, dermatovenereologo, nefrologo, medico di famiglia.

letteratura

  • Linee guida per il deferimento e la gestione del lupus eritematoso sistemico negli adulti. Comitato ad hoc dell'istituto universitario americano di reumatologia sulle linee guida sistemiche di lupus eritematoso. Artrite Rheum. 1999 settembre; 42 (9): 1785-96.
  • Fauci et al. Principi di medicina interna di Harrison / A. Fauci, D. Kasper, D. Longo, E. Braunwald, S. Hauser, J.L. Jameson, J. Loscalzo; 17 ed. - The McGraw-Hill Companies, 2008.
  • Nossent HC, Rekvig OP.I legami ravvicinati tra lupus eritematoso sistemico e anticorpi anti DNA a doppio filamento auspicati e raggiungibili? Artrite Res Ther. 2005; 7 (2): 85-7. Epub 2005 10 febbraio Recensione.
  • Egner W. L'uso di test di laboratorio nella diagnosi di SLE. J Clin Pathol. 2000 giugno; 53 (6): 424-32. Review.
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